miR-222通過作用於ETS1調節鼻息肉組織中Th17細胞分化

《miR-222通過作用於ETS1調節鼻息肉組織中Th17細胞分化》是依託中山大學，由李華斌擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：miR-222通過作用於ETS1調節鼻息肉組織中Th17細胞分化
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：李華斌
• 依託單位：中山大學

中文摘要

我們及國內外其他學者研究證實，國人鼻息肉存在特徵性的Th17細胞優勢分化，鑒於miRNA被證實參與調控Th17細胞分化，ETS1又是Th17細胞分化的負調控因素，而miR-222可下調ETS1，因此我們假設國人鼻息肉患者的Th17細胞的優勢分化可由miR-222通過ETS1進行調控。為此，本研究擬首先檢測鼻息肉組織中miRNA差異表達及中性粒細胞浸潤、Th17細胞因子和ETS1水平並進行關聯分析和組織定位，確定miR-222和其靶向ETS1，然後通過離體鼻息肉細胞以及Jurkat細胞株的培養，在構建miR-222慢病毒載體轉染和ETS1拮抗等干預檢測其對於CD4+細胞分化的影響，並採用transwell技術評估Th17細胞分化對於中性粒細胞的浸潤趨化作用；最後通過基因晶片技術篩選可能的信號通路，通過慢病毒載體動物實驗證實該過程及相關信號機制，為剖析鼻息肉的發病機制提供依據並篩選干預靶點。

結題摘要

慢性鼻竇炎、鼻息肉發病過程中Th17細胞的分化機制和促炎效應尚不清楚。本研究檢測了檢測了國人鼻息肉的臨床表型特徵，評估了嗜酸性粒細胞化和中性粒細胞化的鼻息肉組織中差異表達的miRNA與Th17相關細胞因子相關性；並重點以miR-222、miR-223、miR-17等為研究靶點，通過體外各種實驗手段探索了其靶基因，檢測了Th17細胞和Treg細胞類型的細胞因子如IL-17A、IL-21等在炎症反應中的作用並驗證了其作用通路；研究發現，中國發現慢性鼻竇炎患者鼻息肉組織中抗菌蛋白如SPLUNC1等較對照鼻黏膜組織降低，證實非嗜酸性鼻息肉組織中SPLUNC1的表達更高並且可以被Th17細胞的IL-17A細胞因子上調；檢測了鼻息肉組織中Foxp3蛋白的表達情況和GSK-3β之間的關聯性，證實息肉組織中GSK-3β表達與Foxp3存在負相關；檢測了鼻息肉患者組織中IL-17A、SAA的表達情況，證實Th17細胞的主要因子IL-17A與SAA表達增高存在關聯，通過細胞培養的體外實驗，證實該過程與IL-17A誘導的ERK信號通路活化有關；另外檢測了鼻息肉患者組織中IL-17A和MUC5AC的表達情況，證實IL-17A與MUC5AC高表達和杯狀細胞過度化生有密切關聯。在miRNA在慢性鼻竇炎發病中的作用研究方面，通過組織學分析結合體外實驗，系統性檢測了嗜酸性和非嗜酸性慢性鼻竇炎患者鼻息肉組織的組織學特徵和miRNA表達譜的差異；發現慢性鼻竇炎鼻息肉組織中存在miR-146a等的下調，miR-222、miR-223、miR-17表達的上調；發現miR-222的表達增高並且與Th17細胞因子的表達存在相關性；另外通過體外轉染miR-222能夠調控ETS-1的表達，提示ETS-1可能是miR-222調控鼻息肉中Th17優勢分化的靶點；通過體外實驗證實IL-17A、IL-13等可以刺激Ets樣因子誘導的MUC5AC的表達，但IL-17A誘導的Ets樣因子和MUC5AC高表達對激素治療相對不敏感；證實了炎症條件下由IL-6/ miR-17信號通路介導的一種非Foxp3依賴性Treg細胞免疫活性的調控機制，即miR-17通過負調控Eos在內的Foxp3相關共調節分子的表達而抑制Treg細胞抑制功能的發揮。這些研究為闡明Th17在慢性鼻竇炎鼻息肉發病中的作用，探索更有效的干預靶點提供了基礎。