《miR-125b調控紅細胞脫核成熟的作用及其機制研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由謝小燕擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-125b調控紅細胞脫核成熟的作用及其機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：謝小燕
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
誘導幹細胞紅系分化可能解決目前臨床血供短缺的問題，但是如何提高紅細胞成熟和脫核效率是該技術中一個急待解決的關鍵問題。我們試圖利用miR-125b 來提高紅細胞成熟的效率。已有研究顯示miR-125b能通過靶向凋亡相關基因調節造血幹細胞的增殖和動態平衡。我們前期的研究發現，miR-125b 具有促紅細胞成熟和脫核的潛能，在成熟紅細胞中有miR-125b 的富集，而在成紅細胞或紅白血病細胞系中過表達miR-125b 也能促進細胞的成熟和脫核，抑制其表達則出現相反效果，Bcl-2和SMARCD2可能參與了這個過程。本課題將通過轉基因實現miR-125b 功能的缺失或獲得（LOF/GOF）確定其對紅細胞脫核的作用，進一步利用信息學和靶基因LOF/GOF 確定在紅細胞脫核成熟過程中發揮關鍵作用的miR-125b 靶基因，研究脫核的細胞及分子機制，最終提高體外誘導紅細胞成熟的效率，滿足臨床套用需求。
結題摘要
誘導幹細胞紅系分化可能解決目前臨床血供短缺的問題，但是如何提高紅細胞成熟和脫核 效率是該技術中一個急待解決的關鍵問題。已有研究顯示miR-125b能通過靶向凋亡相關基因調節造血幹細胞的增殖和動態平衡，而我們前期的研究發現，miR-125b 具有促紅細胞成熟和脫核的潛能，因此本研究中我們試圖利用miR-125b 來提高紅細胞成熟的效率，並對其作用機製做深入分析。本項目研究發現，在成熟紅細胞中有miR-125b 的富集，而在成紅細胞或紅白血病細胞系中過表達miR-125b 也能促進細胞的成熟和脫核，抑制其表達則出現相反效果；真性紅細胞增多症病人中外周血有核紅細胞比例增加，與之相對應的，外周血miR-125b的表達也低於正常人；在小鼠骨髓腔中注射miR-125b inhibitor，將導致骨髓、脾臟及外周血中有核紅細胞的比例增加；這些發現均提示miR-125b參與紅細胞的脫核調控。在miR-125b促紅細胞成熟脫核的過程中，我們觀測到線粒體膜電位的下降，細胞及細胞核的收縮，但紅細胞的凋亡水平未發生明顯改變；進一步分析miR-125b作用的信號通路，利用生物信息學和靶基因LOF/GOF 確定在紅細胞脫核成熟過程中發揮關鍵作用的miR-125b靶基因，最終確定，Bcl-2和SMARCD2可能參與了紅細胞的脫核調控，Bcl-2通過改變線粒體膜電位，活化凋亡相關基因caspase3，進一步活化細胞骨架調節蛋白Rock1，調節細胞骨架，促進紅細胞脫核；SMARCD2則通過直接調節細胞核的凝集狀態促進紅細胞成熟脫核。對鼠源及人源紅系祖細胞轉染miR-125b，移植體內，均能觀查到紅細胞成熟的提前，並在小鼠體內檢測到成熟的人源紅細胞。這類體外製備的紅細胞未來有望用於輸血，滿足臨床套用的需求。
