let-7a抑制尤文肉瘤惡性表型的分子機制研究

《let-7a抑制尤文肉瘤惡性表型的分子機制研究》是依託南昌大學，由曹凱擔任項目負責人的地區科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：let-7a抑制尤文肉瘤惡性表型的分子機制研究
• 項目類別：地區科學基金項目
• 項目負責人：曹凱
• 依託單位：南昌大學

項目摘要

尤文肉瘤(ES)是一種高度惡性骨腫瘤,異常活躍的IGF1/IGF1R信號是ES細胞抗凋亡與增殖的關鍵.miRNA參與腫瘤的發生、發展.是否有miRNA參與調控IGF1/IGF1R信號途徑引起了我們的關注.我們前期對ES組織進行了miRNA晶片分析,發現let-7a的表達明顯下調，並通過Northern得到證實;運用miRNAs靶基因預測軟體分析let-7a發現:IGF1R極有可能是let-7a負調控的靶基因.我們進一步鑑定了IGF1R為let-7a的靶基因，結果支持了我們的推測.因此,本研究將在上述前期工作的基礎上,探討let-7a負調控靶基因IGF1R抑制ES細胞惡性表型的分子機制,並通過裸鼠成瘤實驗進行驗證.課題將為深入研究let-7a調控ES的發生、發展及轉歸奠定基礎;為ES提供一條潛在的治療途徑;為新型藥物的研製奠定基礎;同時,將進一步闡釋miRNA調控腫瘤的機制.

結題摘要

（一） 中文摘要： 多項研究表明miRNA在腫瘤發生髮展的多項生物學過程中扮演著重要的角色。本研究中我們首先在 8 對尤文肉瘤(ES)組織和瘤旁正常組織中檢測 let-7a 的表達，結果顯示 let-7a 在ES組織中呈表達下調的趨勢，我們接著檢測了ES細胞A673、SK-ES-1、RD-ES細胞以及MSC細胞let-7a的表達水平，發現ES細胞中let-7a的miRNA表達水平低於MSC細胞。然後我們鑑定了CDK6是let-7a的直接靶基因，同時我們在尤文肉瘤細胞系A673、SK-ES-1 中過表達let-7a和敲低CDK6(si-CDK6)，觀察其對細胞增殖、周期、凋亡、遷移及侵襲的影響，結果顯示 let-7a以及si-CDK6可明顯的抑制細胞增殖、遷移及侵襲，同時早期凋亡的細胞明顯增多。let-7a通過直接靶向 CDK6在ES發展中發揮作用。最後，我們利用裸鼠進行荷瘤實驗，多點注射 let-7a mimics 觀察其對瘤塊生長的影響，進一步證明了過表達let-7a可明顯地抑制腫瘤的生長。我們研究證實let-7a能夠明顯抑制尤文肉瘤細胞的增殖，促進腫瘤細胞的凋亡，抑制腫瘤細胞的周期進程，上述作用可通過抑制CDK6的表達實現的。我們的實驗為 let-7a用於尤文肉瘤的診斷和治療奠定了生物學基礎。