《TWIST在胃癌血管生成中的調控作用與機制》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由韓霜擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：TWIST在胃癌血管生成中的調控作用與機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：韓霜
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
TWIST是具有bHLH結構的轉錄因子，近年來發現其參與了多種腫瘤的發生、侵襲、轉移。最近發現TWIST可參與腫瘤血管生成，但機制仍不明確。我們前期工作首次研究了TWIST與胃癌的關係，發現：TWIST在胃癌組織和細胞系中均過表達，體外試驗研究表明TWIST通過影響胃癌細胞的凋亡、侵襲、轉移和血管的生成參與胃癌發生髮展，動物試驗證實抑制TWIST能顯著抑制腫瘤生長，因此TWIST很可能成為針對胃癌細胞及新生血管內皮細胞雙向治療的靶分子；同時我們通過建立缺氧模型，發現了TWIST的表達受HIF-1的調控。本研究結合課題組與國際上腫瘤血管生成最新研究進展，擬利用串聯親和純化、雙向電泳、CHIP和啟動子晶片等高通量技術，研究與TWIST相互作用的分子及受其調控的血管生成相關靶基因，闡明TWIST在胃癌血管生成中可能的機制，為深入理解胃癌血管生成的機制奠定理論基礎，為治療胃癌和預防復發提供新思路。
結題摘要
TWIST是具有bHLH結構的轉錄因子，近年來發現其參與了多種腫瘤的發生、侵襲、轉移。最近發現TWIST可參與腫瘤血管生成，但機制仍不明確。我們前期工作初步研究了TWIST與胃癌的關係，在本基金資助下，我們進一步的工作發現：（1）胃癌組織的免疫組織化學結果統計學分析表明：TWIST在中、低分化腺癌中的陽性率高於高分化腺癌，在有淋巴結轉移的胃癌中TWIST陽性率高於無淋巴結轉移的胃癌，（2）TWIST小干擾RNA轉染的胃癌細胞增殖、侵襲、遷移以及體內成瘤能力均降低，（3）在缺氧或轉染HIF-1後，twist表達升高；通過建立缺氧模型，發現了TWIST的表達受HIF-1的調控；利用生物信息學分析，發現在TWIST的啟動子轉錄啟始點附近-1442～+152範圍記憶體在HRE可能的結合位點；構建了報告基因載體，雙螢光素酶報告基因系統檢測證實在-1442～+152的區域存在著具有轉錄活性的HIF-1的結合位點。（4）利用ChIP和EMSA的方法證實了TWIST啟動子距轉錄起始位點的-1003～-997處存在HIF-1的結合位點，HIF-1是通過該位點發揮基因激活作用的。（5）體內試驗表明TWIST低表達的細胞移植瘤明顯減小，裸鼠瘤體組織的微血管密度減少。體外細胞培養上清中VEGF濃度減少。VEGF是Twist作用的下游分子之一
