TTC是取作為指示劑用的2、3、5-Triphenyte-trazoliumchloride(氯化三苯基四氮唑)的頭一個字母的縮寫，其原理是如果乳中有抗生素存在，則在向試樣中加入菌種(嗜熱鏈球菌)培養時細菌不增殖。此時，由於作為指示劑加入其中的TTC不還原，所以，仍呈無色狀態。相反，如果沒有抗生素存在，則加入的試驗菌即行增殖，TTC還原變成紅色，試樣也隨之染成紅色。也就是說試樣呈奶的原色時為陽性，染成紅色時陰性。
基本介紹
- 中文名：TTC試驗
- 外文名：2、3、5-Triphenyte-trazoliumchloride
- 作用：抗生素檢驗
- 別稱：氯化三苯四氮唑法
簡介,概念,原理,操作,
簡介
概念
TTC試驗又稱氯化三苯四氮唑法，最早由Neel和Calbert2人在1955年提出。20世紀50年代TTC法是日本檢測牛乳中青黴素殘留的法定方法。該法1955年4月1日起在我國生效為法定方法。TTC法是我國鮮乳中抗生素殘留檢測的標準方法(GB4789．27-2008)第一法。
原理
其測定原理是:如果牛奶中有抗生素存在，當奶中加入菌種(嗜熱鏈球菌)經培養後，菌種不增殖，此時加入的TTC指示劑不發生還原反應，所以仍呈無色狀態;如果沒有抗生素存在，則加入菌種後，嗜熱鏈球菌就生長繁殖，在新陳代謝過程中產生的氫，使無色的氧化型的TTC還原成紅色的還原型的TTC，使樣品染成紅色，即牛奶的顏色不變為陽性，染成紅色為陰性。由視覺判斷。該法簡便、快速、無需特殊設備，很適合牧場、乳品場及食品衛生檢測部門採用，該法的檢測時間為2.5h以上，3-4h可見報告，各種抗生素的檢測靈敏度（最低檢出量）為：青黴素0.004U/mL，鏈黴素0.5U/mL，慶大黴素0.4U/mL，卡那黴素5U/mL。1959年Parks和Doan認為,TTC法在檢測青黴素和氯黴素上敏感度與枯草桿菌紙片法大致相等,而對鏈黴素不敏感,對新黴素檢測效果很差。也有認為消毒劑會干擾試驗。1958年Dragon建議TTC法加做乳糖發酵產氣及酵母培養試驗可以證明抑菌的效果是由抗生素還是消毒劑引起。
操作
設備和材料：水浴箱、溫箱、1ml與10ml滅菌試管各2支、滅菌巧15x15mm試管3支，100℃溫度計、蠟筆、試管架。
培養基和試劑菌種：嗜熱乳鏈球菌、經113℃溫度滅菌20min的脫脂乳。TTC試劑；稱取2，3，5一氯化三苯基四氮唑1g，溶於25ml滅菌蒸餾水中，裝人褐色瓶在7℃以下冰櫃暗處保存。臨用時用滅菌蒸餾水稀釋至5倍。
菌液製備：將菌種移種脫脂乳，經36℃的溫度培養15h後，以滅菌脫脂乳1:1的比例稀釋待用。
