TC染色是TTC和活細胞線粒體內的琥珀酸脫氫酶反應,生成紅色的甲臢,用來表示細胞的活力。配製多為2%,染色要避光,37度條件下,它是評價腦缺血損傷常用的指標。
基本介紹
- 中文名:TTC染色
- 原理:脂溶性光敏感複合物
- 時間:1894年
- 作用:檢測種子的生存能力
TTC染色
1原理:TTC(2,3,5—氯化三苯基四氮唑)是脂溶性光敏感複合物,1894年首次合成用來檢測種子的生存能力,1958年開始用來染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。它是呼吸鏈中吡啶—核苷結構酶系統的質子受體,與正常組織中的脫氫酶反應而呈紅色,而缺血組織內脫氫酶活性下降,不能反應,故不會產生變化呈蒼白。
2 取腦:可麻醉後直接取腦或經生理鹽水灌注後取腦。因為腦組織未用多聚甲醛固定,所以較軟,取腦時更應仔細,保持大腦的完整性。
3 -20度冰櫃中速凍20分鐘左右,便於切片。
4 切片:一般切成5-6片,每隔2mm切一片。第一刀在腦前極與視交叉連線中點處;第二刀在視交叉部位;第三刀在漏斗柄部位;第四刀在漏斗柄與後葉尾極之間。(參考:張均田,主編.現代藥理試驗方法)。如果需計算面積的話,應切得均勻或用專門的腦槽。
5將切片置於TTC中,常規濃度為2%,也有用1%或更低濃度的。
6用錫箔紙蓋住後,放入37C溫箱15~30min,不時翻動腦片,使均勻接觸到染色液。也可以用將腦片放入多孔板,再滴入TTC,覆以圓形蓋玻片使均勻染色。
7 染色後效果:為皮層下梗死。