TRPA1和TRPM8在牙髓冷敏感中的作用機制研究

《TRPA1和TRPM8在牙髓冷敏感中的作用機制研究》是依託武漢大學，由馬霄擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：TRPA1和TRPM8在牙髓冷敏感中的作用機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：馬霄
• 依託單位：武漢大學

項目摘要

牙髓冷敏感在口腔臨床治療中十分常見，被視為口腔疾病中的感冒。但目前牙髓冷敏感的發病機制還不清楚。瞬時受體電位通道(TRP)家族中冷敏感受體TRPM8 和TRPA1的發現為牙髓冷敏感研究提供了新的角度。在臨床上我們發現，漂白劑中的過氧化氫所引起的牙髓冷敏感症狀與TRPM8介導涼刺激、TRPA1介導冷刺激痛的特徵一致。該現象表明牙髓中可能存在由TRPM8 和TRPA1介導的冷敏感傳導通路，國內外相關研究較少。本課題根據國內外最新研究和前期實驗結果，提出了以冷敏感受體為主導的傳導機制。擬通過RealtimePCR、Western blot、免疫組化、鈣離子成像和膜片鉗等生物學方法檢測在不同冷刺激下TRPM8和TRPA1的表達、分布和活性變化，並嘗試將體外檢測結果與臨床症狀相關聯。並期望能套用所探明的機制篩選出能夠套用於臨床上的脫敏劑，為徹底克服牙髓冷敏感提供理論支持。

結題摘要

前言: 牙本質敏感的機制研究一直以來爭議較多。流體動力學說是最為廣泛接受的假說。冷刺激是引起牙本質敏感最主要刺激之一。而冷刺激是直接被感知，還是流體動力學說被感知，仍然存在爭議。此外，在牙本質小管內，同時存在兩種結構，成牙本質細胞突起和牙髓神經末梢。這兩種細胞均有研究證明TRP通道的存在，即均有感知刺激的功能。對於哪一個在牙本質敏感中發揮著主要的感受刺激的功能這一問題，鮮有文獻報導。 方法與材料： 將4weekSD大鼠隨機分為三組，空白組，漂白組，薄荷醇組。通過使牙本質暴露，封存雙氧水，薄荷醇，構建牙本質敏感動物模型，觀察行為學變化。提取原代牙髓細胞和三叉神經細胞，通過western blot技術，single-cell PCR技術，免疫螢光技術檢測牙本質敏感情況下TRPA1通道和TRPM8通道的表達和功能情況變化。 結果： 在進行六天封藥刺激後，檢測到敏感組動物的進水量，體重，進食量與漂白組動物相比，都發生了明顯的改變。（P＞0.05）通過半定量PCR、免疫螢光技術發現敏感組動物的TRPA1通道和TRPM8通道的表達量明顯上調。 結論： 綜上所訴，我們認為牙本質冷敏感刺激的感知可以直接由冷敏感通道TRPA1通道和TRPM8通道的表達感知。並且牙本質敏感導致的冷敏感性增加與TRPA1通道和TRPM8通道的表達上調有關。