《TMEFF2與SHP-1結合的結構機制及其在胃癌發生髮展中的作用》是依託上海交通大學，由杜婉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：TMEFF2與SHP-1結合的結構機制及其在胃癌發生髮展中的作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：杜婉
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
胃癌的發生髮展涉及基因調控失常和蛋白質-蛋白質相互作用異常。本課題組用基因表達譜晶片篩選出TMEFF2基因（由一個表皮生長因子類似結構域和兩個卵泡抑素類似結構組成）。前期研究表明TMEFF2在胃癌組織中的表達顯著高於癌旁組織，並可通過誘導胃癌細胞發生細胞周期阻滯、促進細胞凋亡從而抑制胃癌細胞增殖。我們亦發現TMEFF2可與在胃癌中發揮重要抑癌基因作用的絡氨酸磷酸酶SHP-1直接結合，且在胃癌的發生髮展中可能發揮協同抑制作用。然而目前還不清楚兩者結合的確切結構機制以及其結合對胃癌生物學行為的影響。本研究擬在前期工作的基礎上通過人組織標本、細胞學實驗和動物體內實驗進一步明確：①TMEFF2與SHP-1在胃癌發生髮展不同時期的結合變化情況及其意義； ②TMEFF2與SHP-1結合的確切結構域及胺基酸位點；③TMEFF2與SHP-1的結合對胃癌生物學行為的影響。以揭示TMEFF2與SHP-1的蛋白質相互作用在胃癌發病中的意義，探討新的干預靶點，為胃癌治療提供理論依據。
結題摘要
胃癌致死率在世界範圍內位居惡性腫瘤第二位，胃癌的發生與發展涉及多種基因調控失常。我們採用基因表達譜晶片研究胃癌及其配對的癌旁組織中表達差異的基因發現跨膜蛋白TMEFF2在70%胃癌組織中表達降低顯著 (P＜ 0.001)。胃癌細胞中過表達TMEFF2後，有1442基因表達下調，有1395基因表達增高,這些基因大多涉及細胞增殖、凋亡、DNA損傷。TMEFF2可以抑制胃癌細胞增殖、使胃癌細胞發生G2/M期阻滯、促進胃癌細胞凋亡。裸鼠體內實驗亦顯示 TMEFF2 可顯著抑制胃癌細胞生長、誘導胃癌細胞凋亡。通過液相色譜-質譜分析、蛋白質免疫共沉澱、免疫螢光及GST pull down證實TMEFF2 可與SHP-1 相互結合。SHP-1編碼的蛋白是介導一系列細胞進程的絡氨酸磷酸酶。我們發現作為跨膜蛋白的TMEFF2抑制細胞增殖和促進細胞凋亡的作用依賴於其與蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1的相互結合。我們轉染TMEFF2 胞內區缺失的質粒後，TMEFF2 與SHP-1 相互結合的作用減弱，TMEFF2 抑制細胞增殖的能力也明顯減弱，提示TMEFF2 可能通過其胞內區與SHP-1 結合，進而發揮抑制細胞增殖的作用。另一方面，SH P-1可通過兩個SH2 結構域與TMEFF2 相互結合併且T MEFF2 抑制細胞增殖的作用依賴於上述兩者的結合作用。與TMEFF2 的表達類似，SHP-1 從胃正常黏膜經萎縮伴腸化 、異型增生到腸型胃癌的過程中表達逐漸降低。TMEFF2高表達的胃癌患者預後較好(P=0.0148; HR, 0.57; 95% CI, 0.37–0.90)。SHP-1 高表達胃癌患者的生存期顯著長於低表達患者。TME FF2 與SHP-1均高表達的胃癌患者較兩者均低表達的胃癌患者、或只有一個指標高表達的胃癌患者生存期顯著延長。兩者聯合套用可用來預測胃癌患者的預後。此項研究揭示了TMEFF2在胃癌中的生物學功能、臨床意義及與SHP-1相互作用的機制，可能為胃癌的早期預警和胃癌的治療提供新的靶點。
