《TCR/NKG2D共刺激誘導CD4+NKG2D+T細胞表達TGF-β的轉錄調控機制》是依託揚州大學，由龔衛娟擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：TCR/NKG2D共刺激誘導CD4+NKG2D+T細胞表達TGF-β的轉錄調控機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：龔衛娟
- 依託單位：揚州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
我們前期工作發現，荷瘤小鼠及pCD86-RAE-1轉基因小鼠體記憶體在一群獨特的調節性CD4+NKG2D+T細胞，受TCR和NKG2D的共同刺激而活化，表達膜型TGF-β和FasL發揮免疫調節作用。然而關於TCR/NKG2D活化後誘導TGF-β轉錄的分子機制，目前尚不清楚。本研究擬首先觀察受TCR/NKG2D共刺激後，該調節性CD4+NKG2D+T細胞內NF-κB的活化情況及其是否調控TGF-β基因的轉錄，而去磷酸化STAT3是否通過與NF-κB的結合間接調控TGF-β基因的轉錄；其次分析Egr3是否及如何調控TGF-β基因的轉錄；並且觀察由MAPK/PI3K途徑介導的AP-1活化在TGF-β基因轉錄調控中的作用。研究結果將闡明CD4+NKG2D+T細胞內由TCR/NKG2D受體介導的TGF-β轉錄調控機制，為基於抑制CD4+NKG2D+T細胞的生物學活性來開發新型抗腫瘤藥物提供實驗依據。
結題摘要
本項目擬在明確CD4+NKG2D+細胞生物學特性的基礎上，探索CD4+NKG2D+細胞在腫瘤微環境中的誘導條件、促腫瘤活性以及該細胞表達TGF-β1的轉錄調控機制。研究結果表明，CD4+NKG2D+細胞的誘導主要受MHC II類分子和持續性NKG2D配體的共刺激；腫瘤微環境中持續膜表面和可溶性NKG2D配體促進該細胞誘導。CD4+NKG2D+細胞分泌TGF-β1、IL-10和sFasL抑制DC和效應性T細胞活性而促進腫瘤進展。CD4+NKG2D+細胞受CD3抗體和sRAE-1分子聯合刺激後，PI3K-p85亞單位活化，繼而通過JNK激活下游的 AP-1、NF-κB、STAT3、Egr-2/3活化調節TGF-β1的轉錄。MAPK、NF-κB、STAT3調節Egr-2表達，而對Egr-3表達無明顯影響。EMSA實驗表明Egr-2/3可直接結合TGF-β1啟動子促進其表達。在CD4+NKG2D+細胞中，SOCS3主要受Egr-3表達的調節。中藥單體落新婦苷被認為具有免疫調節活性。本研究發現落新婦苷具有明顯誘導CD4+NKG2D+細胞的活性，促進其分泌TGF-β1和 IL-10，誘導其表達CCR6和CCR9。經落新婦苷刺激的CD4+NKG2D+細胞具有抑制CD8+T細胞和巨噬細胞的活性，且該活性依賴TGF-β1和 IL-10的分泌。落新婦苷對DSS-腸炎的保護作用與其誘導CD4+NKG2D+細胞有關。過繼輸入經落新婦苷刺激的CD4+NKG2D+細胞可明顯抑制DSS-腸炎發病。落新婦苷刺激CD4+NKG2D+細胞主要通過激活PI3K、MAPK和STAT3信號來促進TGF-β1分泌。本研究不僅豐富了對CD4+NKG2D+細胞生物學特性的認識，闡明其TGF-β1表達調控分子機制，還為將落新婦苷套用於炎症性疾病治療提供重要實驗依據。
