T4 多聚核苷酸激酶(T4 polynucleotide kinase) 是從感染了噬菌體T4中分離得到的。該酶可將ATP 中V 位上的磷酸基轉移到具有5'一羥基的DNA或RNA 分子上,常簡稱為T4激酶。
基本介紹
- 中文名:T4多聚核苷酸激酶
- 外文名:T4 polynucleotide kinase
- 別名:T4激酶
- 主要用途:廣泛用於DNA和RNA的5'末端標記
T4 多聚核苷酸激酶(T4 polynucleotide kinase) 是從感染了噬菌體T4中分離得到的。該酶可將ATP 中V 位上的磷酸基轉移到具有5'一羥基的DNA或RNA 分子上,常簡稱為T4激酶。
T4 多聚核苷酸激酶(T4 polynucleotide kinase) 是從感染了噬菌體T4中分離得到的。該酶可將ATP 中V 位上的磷酸基轉移到具有5'一羥基的DNA或RNA 分子上,常簡稱為T4激酶。T4核苷酸激酶...
《多聚核苷酸激酶在小鼠神經系統發育過程中的作用》是依託吉林大學,由焦虎平擔任項目負責人的青年科學基金項目。項目摘要 神經系統是胚胎最早發育的系統之一。發育過程既需要Wnt等家族基因參與的細胞增殖分化,也需要Bcl-2等基因家族所調控的...
T4多核苷酸激酶能夠催化磷酸在g-位和雙鏈/單鏈DNA或RNA的5'-羥基末端以及3'-單磷酸核苷間進行轉移和交換:5'-OH +NTP5'-P+NDP。該酶還具有3'磷酸酶活性,將3'-磷酸基團從寡核苷酸的3'磷酸末端、脫氧3'-單磷酸核苷和脫氧3'-...
T4多聚核苷酸激酶能催化γ一dNTP的γ磷轉移至DNA或RNA5'-OH末端的反應。因此常用γ-P-dNTP標記DNA或RNA。為了增高比放性,可將DNA或RNA大分子水解成適當長度的片段,以便有較多的末端被標記。化學標記 DNA在pH5的含放射性碘(I)的水...
步驟(3)的操作為:將TPI啟動子PCR產物和缺失啟動子pYES2質粒PCR產物按2:1混合,用T4多聚核苷酸激酶進行磷酸化後,再用T4DNA連線酶連線。步驟(4)的操作為:將步驟(3)得到的重組表達載體和牛乳鐵蛋白肽基因序列用EcoRI和XhoI核酸...
25皮摩爾標記序列1、50單位T4RNA連線酶以及連線反應的緩衝液;該混合物在25℃孵育1.5h,後再70℃加熱20分鐘,T4RNA連線酶變性;加入T4多核苷酸激酶和1nmATP,反應10個循環,接著在75℃孵育20分鐘使額外的多核苷激酶變性;純化:產物...
用於Southern印跡雜交的探針可以是純化的DNA片段或寡核苷酸片段。探針可以用放射性物質標記或用地高辛標記,放射性標記靈敏度高,效果好;地高辛標記沒有半衰期,安全性好。人工合成的短寡核苷酸可以用T4多聚核苷酸激酶進行末端標記。探針標記的...
第八節T4多聚核苷酸激酶/42 複習思考題/42 第三章 基因載體的選擇與構建/43 第一節 基因載體、報告基因與載體的致死效應/43 一、基因載體的概念/43 二、載體的報告基因(標記基因) /44 三、載體的致死效應/44 第二節 細菌質粒...
二、T4多聚核苷酸激酶對DNA的修飾 作用74 三、鹼性磷酸酶對DNA的修飾作用75 本章小結75 思考題76 第五章基因工程載體77 第一節質粒載體77 一、質粒的一般生物學特性77 二、理想質粒載體的必備條件78 三、常用的質粒載體79 第二節...
三、T4DNA聚合酶 四、逆轉錄酶 五、末端脫氧核苷醯轉移酶 六、核酸酶Sl 七、核酸酶BAL31 八、外切核酸酶Ⅲ 九、T4多聚核苷酸激酶 十、鹼性磷酸酶 十一、甲基化酶 複習思考題 第三章 基因克隆載體 第一節 質粒載體 一、質粒的...
12.6T4多聚核苷酸激酶 12.7小牛腸磷酸酯酶 13聚合酶鏈反應(PCR)13.1介紹 13.2技術 13.3套用領域 14DNA測序 14.1介紹 14.2DNA測序方法 14.3人類基因組測序策略 14.4DNA測序的實際意義 15克隆步驟 15.1介紹 15.2重組載體...
六、T4多聚核苷酸激酶 七、S1核酸酶 八、逆轉錄酶 第三節 基因工程載體 一、大腸桿菌載體 二、酵母載體 三、植物載體 四、動物載體 第四節 目的基因的製備 一、基因組文庫法 二、cDNA文庫法 三、化學合成法 四、聚合酶鏈式反應 ...
四、多聚核苷酸激酶T4PNK 五、T7DNA聚合酶 六、逆轉錄酶 本章問題 第三章 基因工程的載體 第一節 質粒的一般特性 一、質粒的生物學特性 二、質粒DNA的構型 三、質粒DNA的提取 第二節 常用的質粒克隆載體 一、pBR322質粒 二、p...
末端標記核酸末端標記核酸就是一種末端標記的方法。末端標記法:在大腸桿菌T4噬菌體多聚核苷酸激酶(T4PNK)的催化下,將γ-32P-ATP上的磷酸連線到寡核苷酸的末端上。要求標記的寡核苷酸5’端必須帶羥基。此法適用於標記合成的寡核苷酸...
二、T4多聚核苷酸激酶對DNA的修飾作用74 三、鹼性磷酸酶對DNA的修飾作用75 本章小結75 思考題76 第五章 基因工程載體77 第一節 質粒載體77 一、質粒的一般生物學特性77 二、理想質粒載體的必備條件78 三、常用的質粒載體79 第二節...