《SphK-1/S1P信號通路介導糖尿病腎臟纖維化的作用與機制》是依託中山大學，由黃河清擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：SphK-1/S1P信號通路介導糖尿病腎臟纖維化的作用與機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：黃河清
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
腎臟纖維化是糖尿病腎病（DN）的主要病理特徵之一。我們前期研究表明：糖尿病模型動物腎損害、伴隨著SphK1/S1P通路的激活。體外預實驗發現：高糖刺激腎小球系膜細胞（GMC）導致其SphK1表達持續增加的同時、纖維連線蛋白（FN）表達亦明顯增加，干預SphK1可顯著影響FN表達。初步認為SphK1/S1P通路激活（持續活化）對於糖尿病腎臟纖維化形成可能具有重要的介導作用。在此基礎上，本研究擬通過細胞與動物模型證實Sphk1/S1P通路的激活（持續活化）在糖尿病腎臟纖維化的明確作用；從細胞模型觀察干預Sphk1/S1P通路對核因子AP-1的影響，干預AP-1後對GMC纖維化的影響、對Sphk1/S1P通路持續活化的正反饋調節。以闡明Sphk1/S1P通路介導糖尿病腎臟纖維化的重要作用與核因子AP-1調節的分子機制，為探尋將Sphk1/S1P通路作為抑制腎臟纖維化、抗DN的作用靶點奠定基礎。
結題摘要
項目的背景：腎臟纖維化是糖尿病腎病（DN）的主要病理特徵之一。我們前期研究表明：糖尿病模型動物腎損害、伴隨著SphK1/S1P通路的激活。體外預實驗發現：高糖刺激腎小球系膜細胞（GMC）導致其SphK1表達持續增加的同時、纖維連線蛋白（FN）表達亦明顯增加，干預SphK1可顯著影響FN表達。初步認為SphK1/S1P通路激活（持續活化）對於糖尿病腎臟纖維化形成可能具有重要的介導作用。本研究在於確證Sphk1/S1P信號通路的激活（持續活化）介導糖尿病腎臟纖維化的病變作用，探討Sphk1/S1P信號通路持續活化的分子機制。 主要研究內容：1、Sphk1/S1P信號通路介導GMC纖維化的體外細胞模型確證及體內動物模型確證；2 、Sphk1/S1P信號通路介導GMC纖維化的核因子AP-1的調節機制，干預AP-1後對GMC纖維化指標的影響、對Sphk1/S1P信號通路正反饋調節的影響。 重要結果：1、體外細胞模型運用SphK-1的抑制劑、 SphK-1 siRNA、過表達SphK-1及外源性的S1P等不同方法干預均可顯著影響高糖誘導的GMC的FN的表達。2、實驗性糖尿病腎損害模型動物的腎功能異常，腎組織基質成分明顯增多，FN等炎性、纖維化成分的表達明顯增加；同時腎組織SphK-1蛋白表達與活性、S1P含量較正常組相比明顯升高；免疫組化結果顯示小鼠腎組織的SphK-1主要表達於腎小球細胞。3、模型動物的腎組織與高糖培養的GMC中S1P受體各亞型以2亞型的表達最明顯。4、干預SphK-1、調節FN的作用與影響核因子AP-1的DNA結合活性密切相關；5、GMCs 中SphK1的啟動子調節區和轉錄起始後非編碼區存在多個AP-1結合位點。siRNA干擾c-Jun、c-Fos後，能明顯抑制GMCs中SphK1和纖維化成分FN的蛋白表達。過表達c-Jun/c-Fos後，GMCs中SphK1和FN的表達明顯增加，提示AP-1對SphK-1的正反饋調節作用是Sphk1/S1P信號通路持續活化的重要機制。 科學意義：本研究證實了Sphk1/S1P信號通路的激活（持續活化）在糖尿病腎臟纖維化的病理進程中的關健介導作用，為以Sphk1/S1P信號通路為潛在靶點干預糖尿病腎病提供了重要依據。
