TGR5對糖尿病腎臟纖維化的影響及其相關分子機制研究

《TGR5對糖尿病腎臟纖維化的影響及其相關分子機制研究》是依託中山大學，由黃河清擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：TGR5對糖尿病腎臟纖維化的影響及其相關分子機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：黃河清
• 依託單位：中山大學

中文摘要

糖脂代謝紊亂、腎臟慢性炎性反應是糖尿病腎病（DN）、腎臟纖維化的重要病因病機，我們已證實SphK1/S1P通路的活化與糖尿病腎臟纖維化關係密切。近年來有充分證據表明膽汁酸膜受體TGR5具有顯著調節糖脂代謝及抗炎作用。鑒於TGR5亦高表達於腎臟組織，TGR5能否抑制糖尿病狀態下的腎臟炎性反應、阻抑腎臟纖維化的病理進程？以及該作用與影響SphK1/S1P通路的關係，值得高度關注。預實驗結果顯示：TGR5激動劑能明顯抑制模型細胞與模型動物腎組織炎性、纖維化成分及S1P2的表達。本項目在此基礎上，擬通過系統研究TGR5對模型細胞與模型動物腎組織ICAM-1及FN等炎性、纖維化成分的影響，明確TGR5對糖尿病腎臟纖維化的作用；進一步從影響SphK1/S1P通路、調節核因子NF-κB及AP-1的活性等，探討其抗糖尿病腎臟纖維化的分子機制。為將TGR5作為抑制糖尿病腎臟纖維化、抗DN新靶點提供實驗依據。

結題摘要

項目背景與主要研究內容： 糖脂代謝紊亂、腎臟慢性炎性反應是糖尿病腎病（DN）、腎臟纖維化的重要病因病機，我們已證實SphK1/S1P通路的活化與糖尿病腎臟纖維化關係密切。近年來有充分證據表明膽汁酸膜受體TGR5具有顯著調節糖脂代謝及抗炎作用。鑒於TGR5亦高表達於腎臟組織，TGR5能否抑制糖尿病狀態下的腎臟炎性反應、阻抑腎臟纖維化的病理進程？以及該作用與影響SphK1/S1P通路的關係，值得高度關注。本項目在前期研究基礎上，擬通過系統研究TGR5對模型細胞與模型動物腎組織ICAM-1及FN等炎性、纖維化成分的影響，明確TGR5對糖尿病腎臟纖維化的作用；進一步從影響SphK1/S1P通路、調節核因子NF-κB及AP-1的活性等，探討其抗糖尿病腎臟纖維化的分子機制。 重要研究結果與意義： 1. 活化TGR5能夠明顯抑制HG誘導的GMCs炎症因子（ICAM-1）和轉化生長因子（TGF-β1）的表達，細胞外基質主要成分纖維連線蛋白（FN）生成明顯減少。進一步結果顯示，激活TGR5能夠抑制高糖誘導的S1P2表達增多，下調核因子AP-1二聚體中c-Jun/c-Fos的磷酸化水平，降低AP-1的轉錄活性。同為G蛋白偶聯受體家族成員，S1P2與TGR5存在相互作用，並且TGR5激活後能夠促進S1P2內化失活。證實激活TGR5能夠抑制HG誘導的腎小球系膜細胞中炎症纖維化因ICAM-1、 TGF-β1、 FN的過度生成，其機制可能與TGR5抑制S1P/S1P2通路密切相關。2. 在GMCs體外模型中，激動TGR5或者在過表達基礎上激動TGR5能有效地抑制HG引起的RhoA/ROCK的活化，細胞質中IκBα的降解以及p65入核轉位減少，NF-κB的DNA結合活性降低，激活受到抑制。而干擾TGR5，RhoA/ROCK通路異常活化。另外，使用RhoA持續激活型質粒RhoAQ63L活化RhoA/ROCK，FN、TGF-β1蛋白水平異常升高，IκBα發生降解，p65入核增加，NF-κB與DNA的結合活性增強，通路激活；。而使用PKA特異性抑制劑H-89處理GMCs後，INT-777無法抑制RhoA/ROCK通路在高糖條件下的活化。提示TGR5調節FN、TGF-β1等炎症纖維化因子的表達增加也與其通過PKA抑制RhoA/ROCK通路的活化、進而影響核因子NF-κB的激活密切相關。