《蛋白激酶 CK2介導SphK-1/S1P通路調節糖尿病腎臟纖維化的研究》是依託中山大學，由黃河清擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：蛋白激酶 CK2介導SphK-1/S1P通路調節糖尿病腎臟纖維化的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：黃河清
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
糖尿病腎臟纖維化病變是腎臟慢性炎性反應的觀點受到高度重視。我們已證實SphK-1/S1P信號通路對糖尿病腎臟纖維化成分起關健調節作用，然其影響炎性活化的機制尚需進一步闡明。近年來有充分證據表明蛋白激酶CK2的活化與機體糖代謝紊亂、炎性反應病變關係密切。CK2能否影響糖尿病腎臟纖維化的病理進程？該作用是否與SphK-1/S1P信號通路密切相關？引起我們特別關注。預實驗結果顯示了CK2可能具有該作用及其與SphK-1/S1P通路相關聯的重要信息。本項目在此基礎上，擬通過體外細胞模型、體內動物模型、蛋白質相互作用等途徑系統研究確證CK2影響糖尿病腎臟纖維化的作用；探討CK2介導SphK-1/S1P通路影響NF-κB、AP-1等炎症相關核因子的活化，參與調節糖尿病腎臟纖維化的可能作用機制。為闡明糖尿病腎臟纖維化炎性反應活化的新機制、探索抗DN新的潛在作用靶點提供客觀的實驗依據，具有重要的研究意義。
結題摘要
項目背景與主要研究內容：糖尿病腎臟纖維化病變是腎臟慢性炎性反應的觀點受到高度重視。我們已證實SphK-1/S1P信號通路對糖尿病腎臟纖維化成分起關健調節作用，然其影響炎性活化的機制尚需進一步闡明。近年來有充分證據表明蛋白激酶CK2的活化與機體糖代謝紊亂、炎性反應病變關係密切。CK2能否影響糖尿病腎臟纖維化的病理進程？該作用是否與SphK-1/S1P信號通路密切相關？引起我們特別關注。預實驗結果顯示了CK2可能具有該作用及其與SphK-1/S1P通路相關聯的重要信息。本項目在此基礎上，擬通過體外細胞模型、體內動物模型、蛋白質相互作用等途徑系統研究確證CK2影響糖尿病腎臟纖維化的作用；探討CK2介導SphK-1/S1P通路影響NF-κB1等炎症相關核因子的活化，參與調節糖尿病腎臟纖維化的可能作用機制。 重要研究結果與意義： 1. 體內、外研究結果顯示：抑制CK2活性或小分子干擾CK2α明顯抑制高糖處理GMCs的FN、ICAM-1表達，明顯抑制高糖處理GMCs的IκBα的降解及p65的核聚積，明顯抑制高糖處理GMCs的NFκB的DNA結合活性及轉錄活性；抑制CK2活性或基因沉默CK2腺病毒處理明顯改善糖尿病動物的腎臟纖維化，明顯減少糖尿病動物腎臟中的IκB降解及p65的核聚積；TBB治療或基因沉默CK2腺病毒治療明顯改善糖尿病動物腎纖維化，TBB治療或基因沉默CK2腺病毒治療可抑制糖尿病動物腎小球IκB降解和NF-κB核積聚。證實：CK2在調節糖尿病腎臟炎性纖維化病變過程中發揮重要作用。 2. 進一步研究結果顯示：敲低SphK1下調GMCs中FN和ICAM-1的蛋白水平，並抑制NF-κB的核轉位；敲低CK2α抑制過表達外源性SphK1引起的FN、ICAM-1升高，同時降低NF-κB的核轉位及DNA結合活性；過表達外源性SphK1增加正常糖或高糖培養GMCs的pTyr255 CK2α蛋白水平，而敲低SphK1則抑制高糖刺激引起的pTyr255 CK2α蛋白水平升高； SphK1與CK2α在GMCs中存在相互作用，而高糖刺激則能增強兩者之間的相互作用。證實：SphK1/S1P通路通過調節蛋白激酶CK2α的活化、影響NF-κB通路，參與調節了糖尿病腎臟纖維化的病理進程。
