《Septin家族蛋白參與調控早期胚胎染色體排列和紡錘體組裝》是依託北京大學，由朱錦亮擔任負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Septin家族蛋白參與調控早期胚胎染色體排列和紡錘體組裝
- 項目負責人：朱錦亮
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
非整倍體和多核在高齡婦女和形態差的人類胚胎中非常多見。導致人胚胎非整倍體和多核的分子機制還知之甚少。我們前期研究和文獻報導，敲低septin1/2/7導致紡錘體組裝、染色體排列分離異常和多核細胞產生。因此septin1/2/7可能與胚胎非整倍體和多核產生的分子機制有關。本課題擬利用免疫印跡和免疫螢光鑑定septin1/2/7在小鼠和人類胚胎中的表達和定位，分析敲低或過表達septin1/2/7對紡錘體組裝和染色體排列的影響，以及是否產生非整倍體和多核胚胎。本課題還將分析septin1/2/7在人類早期胚胎髮育過程中的表達，觀察過表達septin1/2/7對人類胚胎第一次有絲分裂進程的影響。最後比較高齡婦女胚胎或形態差人類胚胎和正常優質胚胎 septin1/2/7mRNA表達模式和水平的差異。此研究將揭示septin1/2/7參與調控胚胎染色體排列和紡錘體組裝，抑制非整倍體和多核產生的規律。
結題摘要
前期研究中，我們已經證實septin蛋白參與小鼠卵母細胞減數分裂過程中紡錘體組裝和染色體排列。在本項目中，我們對septin蛋白在小鼠胚胎中的免疫螢光定位和功能做了進一步的研究，M2期卵母細胞septin2定位於紡錘體，2細胞到囊胚期septin2呈點狀或彌散狀態分布於細胞核內。FCF是septin的特異性小分子抑制劑，在低劑量濃度下不會對線粒體產生影響，同時選擇性抑制septin功能。用30μM FCF培養2細胞胚胎到囊胚，顯著降低了囊胚形成率（63/197： 32.0%），而對照組的囊胚形成率達到（173/194：89.2%）。用囊胚進行微管和染色體的免疫螢光染色。30μMFCF處理的囊胚，染色體排列明顯紊亂，多條染色體游離於中期赤道板之外，並且紡錘體形態異常。正常對照組的囊胚染色體整齊排列於中期赤道板上， 紡錘體結構正常。本實驗說明septin蛋白參與小鼠胚胎有絲分裂進程的調控並影響染色體排列和紡錘體組裝。 我們利用輔助生殖技術實驗室的臨床資源，總結分析了培養液和培養時間對新生兒出生體重的影響，男性體重指數對活產率和新生兒性別的影響以及卵裂期胚胎質量對妊娠綜合徵和新生兒結局的影響，先關研究結果已經發表於Human Reproduction, Fertility and Sterility, Journal of Assisted Reproduction and Genetics。 我們對高脂飼料誘導的小鼠精子DNA甲基化的變化進行了初步研究，精子DNA全基因組甲基化測序結果顯示8942個差異甲基化區（DMR），其中5277個DMR高甲基化，3665個DMR低甲基化。定位於CG島的DMR有870個，啟動子/外顯子和內含子區DMR有1782個，重複序列DMR有4178個。對8942DMR進行了基因功能的富集發現，1162個DMR相關基因參與代謝調控過程。
