Sema4C調節卵巢淋巴管新生和卵巢功能的作用及機制研究

《Sema4C調節卵巢淋巴管新生和卵巢功能的作用及機制研究》是依託華中科技大學，由葉雙梅擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：Sema4C調節卵巢淋巴管新生和卵巢功能的作用及機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：葉雙梅
• 依託單位：華中科技大學

中文摘要

卵巢功能異常引起的生殖內分泌疾病嚴重困擾著廣大女性的身心健康，甚至會破壞家庭和諧及社會安定。卵巢內淋巴管伴隨月經周期進行周期性的新生和重建，通過影響卵巢微環境來調節卵泡發育。Sema4C是本研究組前期實驗中首次發現的新生淋巴管內皮細胞標記分子，調控淋巴管新生。初步實驗結果證實Sema4C在卵泡周圍淋巴管高表達，其受體PlexinB2在顆粒細胞高表達。腹腔注射Sema4C抗體顯著影響小鼠的妊娠結局。因此，本項目擬首先通過檢測卵巢中Sema4C的作用方式（自分泌？旁分泌？）來明確Sema4C對卵巢微環境的影響，進而採用體內及體外實驗檢測Sema4C對小鼠卵巢超微結構、淋巴管生成、性激素分泌及卵泡發育的影響，旨在為相關疾病的治療提供有價值的靶點和理論依據。

結題摘要

卵巢功能決定女性的生殖內分泌狀態，關乎生活質量、家庭和諧及社會安定。Sema4C是本研究組前期實驗中首次發現的新生淋巴管內皮細胞標記分子，調控淋巴管新生。淋巴管是卵巢微環境的重要成分，與卵巢功能密切相關。因此，Sema4C可能通過影響微環境調控卵巢功能。本項目採用體內外實驗檢測了Sema4C在小鼠卵巢組織中的表達，以及Sema4C調節卵巢淋巴管新生和卵巢功能的作用,結果顯示Sema4C及其受體PlexinB2在3周齡（相當於8.6歲女性）至48周齡（相當於41歲女性）的小鼠卵巢組織中均有表達，但表達水平隨著小鼠年齡增加而顯著降低，Sema4C主要表達於生長卵泡的卵泡膜細胞和卵巢間質細胞，PlexinB2主要表達在顆粒細胞和卵泡膜細胞。同時，卵巢內淋巴管計數也隨著小鼠年齡的增加顯著減少，相關性分析顯示不同年齡階段的小鼠卵巢組織中Sema4C的表達水平和淋巴管計數的一致性良好。體外實驗結果顯示，siRNA干擾Sema4C/PlexinB2後，卵泡膜細胞/顆粒細胞的增殖抑制，衰老細胞數顯著增多，分泌的雄激素/雌孕激素水平顯著降低。為獲得持續而穩定的體內干擾效應，本項目採用卵巢囊內注射的方法將攜帶Sema4CshRNA的腺相關病毒（pAV-4in1Sema4CshRNA-GFP）及對照空載體病毒（pAV-4in1VectorshRNA-GFP 無義序列）分組注射，結果顯示干擾Sema4C組小鼠的卵巢中始基卵泡、次級卵泡數和竇狀卵泡數明顯減少，閉鎖卵泡數顯著增多，而血漿中AMH、雌激素和孕激素水平降低，FSH顯著升高，小鼠產仔率低，產仔數少。本項目研究結果提示，Sema4C促進小鼠卵泡發育及性激素分泌，抑制卵泡閉鎖及始基卵泡池激活，保護卵巢的生殖內分泌功能，推測其機制①Sema4C介導卵泡膜細胞與顆粒細胞之間的互動作用，②Sema4C調節微環境（淋巴管新生），間接促進卵泡發育，維持正常卵巢功能。具體信號途徑及關鍵分子有待深入研究。本項目首次揭示Sema4C調控卵巢功能，擴展了sema4C的研究領域，同時為卵巢功能減退導致的生殖內分泌疾病提供了新的研究思路，具有重要的理論意義及套用前景。