Sema4C促進乳腺癌淋巴管轉移的調控機制及干預研究

《Sema4C促進乳腺癌淋巴管轉移的調控機制及干預研究》是依託華中科技大學，由葉雙梅擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：Sema4C促進乳腺癌淋巴管轉移的調控機制及干預研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：葉雙梅
• 依託單位：華中科技大學

中文摘要

淋巴管轉移是乳腺癌的首要轉移途徑，也是導致乳腺癌治療失敗的主要原因之一。乳腺癌淋巴管生成及轉移的具體調控機制目前仍不明確，極大地制約了乳腺癌治療的進展。Sema4C是申請者所在研究組在前期研究中首次發現的與乳腺癌淋巴管轉移密切相關的分子。前期實驗已證實Sema4C能顯著促進乳腺癌淋巴管生成和淋巴管轉移，但具體調控機制尚未清楚。Sema4C在腫瘤領域的研究罕見，其在腫瘤進展中發揮作用的存在形式（跨模型？分泌型？）和作用方式（配受體？自分泌？旁分泌？）尚未見報導。因此，本項目擬首先在分子水平明確Sema4C的存在形式和作用方式，進而深入研究Sema4C發揮效應的信號途徑並靶向干預關鍵分子。旨在全面揭示Sema4C促進乳腺癌淋巴管生成和轉移的具體調控機制，推動乳腺癌淋巴管轉移的研究進展，並為抑制乳腺癌淋巴轉移的治療策略提供有價值的靶分子。

結題摘要

淋巴管轉移是乳腺癌的首要轉移途徑，也是導致乳腺癌治療失敗的主要原因之一。項目組的前期實驗證實了Sema4C能顯著促進乳腺癌淋巴管生成和淋巴管轉移，為了了解其具體的調控機制，本項目研究了Sema4C在乳腺癌進展中的具體存在形式及作用方式，並深入研究了Sema4C促進乳腺癌進展的信號通路並對關鍵分子進行靶向干預，獲得了如下結果： ㈠、Sema4C的存在形式：螢光抗體試驗證實Sema4C存在於細胞膜上。而Western blot試驗顯示Sema4C既存在跨模型，也存在分泌型。並且Elisa試驗進一步證實：乳腺癌組織內的淋巴管內皮細胞（TLEC）比正常組織內的淋巴管內皮細胞分泌更高濃度Sema4C。 ㈡、Sema4C在乳腺癌進展中的作用方式： ①整體水平：體內試驗顯示Sema4C顯著促進裸鼠乳腺癌生長及淋巴道轉移，而Sema4C單克隆抗體則發揮了顯著的抑制作用。 ②細胞水平：出芽和成管試驗顯示Sema4C顯著促進淋巴管新生。Tanswell及劃痕試驗顯示Sema4C顯著促進乳腺癌細胞侵襲運動，並具有濃度依賴性。趨化試驗顯示TLEC顯著趨化乳腺癌細胞向其運動，這種趨化作用能被Sema4C抗體及Sema4C shRNA阻斷，提示Sema4C在TLEC、乳腺癌細胞及兩種細胞間發揮的作用是相互協同的。 ③分子水平：Sema4C對乳腺癌細胞及TLEC的作用主要通過其受體PlexinB2介導，並且乳腺癌細胞及TLEC都高表達PlexinB2，採用siRNA干擾PlexinB2，乳腺癌細胞的侵襲運動能力及淋巴內皮細胞出芽受到顯著抑制。基因晶片篩選差異顯著的基因，並通過Werstern blot進一步驗證，結果證實Sema4C 與受體Plexin B2結合激活ErBb2, 進而活化RhoA通路，促進乳腺癌細胞侵襲運動。 綜合上述實驗數據，乳腺癌細胞與TLEC都高表達Sema4C及其受體Plexin B2分子，跨模型Sema4C被組織中的酶水解產生分泌型，兩種類型的Sema4C通過自分泌及旁分泌形式與Plexin B2結合，通過活化ErBb2及RhoA信號通路促進乳腺癌組織中淋巴管新生及淋巴道轉移。 本項目詳細闡明了Sema4C在乳腺癌組織中的重要作用及其具體作用機制，極大的促進了乳腺癌的研究進展，為乳腺癌的臨床治療提供了新的靶分子，具有十分重大的理論意義及套用前景。