Schiff反應

為廣泛套用的病理組織染色反應。其顯示糖元的原理，是含有乙二醇基的糖類，在過碘酸的作用下，氧化而產生醛基，醛基與雪夫氏液作用，使無色復紅變成紫紅色染料而使糖元顯示出來，這種反應稱為過碘酸雪夫氏(Periodic acid Schiff)反應，簡稱PAS反應。

定義

Schiff 反應：細胞中的醛基可使Schiff 試劑中的無色品紅變為紅色。這種反應通常用於顯示糖和脫氧核糖核酸（Feulgen 反應）

原理

為廣泛套用的病理組織染色反應。其顯示糖元的原理，是含有乙二醇基的糖類，在過碘酸的作用下，氧化而產生醛基，醛基與雪夫氏液作用，使無色復紅變成紫紅色染料而使糖元顯示出來，這種反應稱為過碘酸雪夫氏(Periodic acid Schiff)反應，簡稱PAS反應。

鹼性復紅是含有醌基的染料，加亞硫酸或二氧化硫後，將酯基結構破壞，則失去顏色，成為無色復紅液，即雪夫氏(Schiff)液。

試劑及操作步驟

1. 1%過碘酸液。
   
2. N鹽酸：比重1.19的濃鹽酸82ml，加蒸餾水至1,000ml；或用比重1.16的鹽酸98.3ml，加蒸餾水至1,000ml。
   
3. 雪夫氏(Schiff)液：配製方法如下。
   (1)取300ml容量的三角燒瓶一個，裝入蒸餾水200ml，加熱煮沸。
   (2)去火後，加入鹼性復紅1g(在煮沸過程中加復紅易噴出)，振盪5min。
   (3)冷至50℃，濾過，加入1M鹽酸20ml。
   (4)冷至25～30℃，加入偏重亞硫酸鈉(Na₂S₂O₅)4～5g，搖勻，此時產生大量氣體，應把瓶蓋緊，讓氣體充分與復紅作用、然後置於暗處過夜，液體變成淡紅色或淡黃色，配製質量好的接近無色，若
   
4. 紅色不褪說明配製過程有問題或藥劑不純。配液不能使用。
   (5)加活性炭1～2g，振搖1min，靜止30min，濾過，以液體完全無色為佳。
   (6)裝入褐色瓶內，在冰櫃中保存。用時取出，等液溫升至室溫(18～22℃)時方可使用。如果液體又變紅，則不能使用。
   
5. 偏重亞硫酸鈉液：
   0.5263mol/L偏重亞硫酸鈉液 7.5ml
   1M鹽酸7.5ml
   蒸餾水130ml
   此液不能久存，每次應現用現配。
   梅野氏蘇木素液。
   操作
   （1）切片脫蠟、速浸水(在水中時間過久，糖元即溶解)。
   （2)入1%過碘酸液氧化5～10min。
   (3)常水沖洗5min，再用蒸餾水洗短時。
   (4)入雪夫氏液10～15min(可將雪夫氏液滴於切片上)。
   (5)傾去染片上的雪夫氏液，然後順次通過三瓶偏重亞硫酸鈉液，在每瓶中約停留1～2min。
   (6)常水沖洗，入梅野氏蘇木素液染3～5min，常水洗至核呈藍色。
   (7)入各級酒精脫水，二甲苯透明，香膠封固。
   
6. 結果