1.福爾根(Feulgen)反應顯示DNA原理：顯示DNA的傳統方法是富爾根（Feulgen）反應，切片先用稀鹽酸處理，DNA經弱酸（1mol/L HCL）水解後，在60℃條件下使DNA分子中脫氧核糖與嘌呤之間的連線打開，脫氧核糖的一端釋放出醛基，並在原位與Schiff試劑反應生成紫紅色產物。
基本介紹
- 中文名：核酸顯示法
- 原理：同PAS反應，細胞核DNA顯紫紅色
- 試劑：Schiff試劑
- 處理：稀鹽酸處理
原理同PAS反應，使細胞核DNA顯紫紅色。在此過程中RNA不受影響，故染色具有DNA特異性。準確的溫度和鹽酸濃度，適宜的水解時間是成功的關鍵。水解過度或不足均降低染色強度。配製試劑：1. 1mol/L HCL:將8.5ml濃鹽酸和91.5ml蒸餾水混合即得；2. 0.5%亮綠水溶液染色步驟：1.取培養於蓋玻片上的貼壁原代細胞，用Hanks液漂洗三次；2.在卡諾（Carnoy）固定液中固定10min，然後蒸餾水洗三次；3.移入60℃濃度為1mol/L的HCL中靜置10min；4.用蒸餾水漂洗幾次；5.放入Schiff試劑中靜置30—60min，可隨時檢查顯色情況；6.用自來水沖洗5min；7.再用蒸餾水漂洗；8.不同濃度梯度乙醇溶液脫水；9.用二甲苯透明、樹膠封片； 結果：原代細胞核內DNA顯 紫紅色，細胞質呈綠色 2.顯示核酸的其它方法：⑴Kurnick甲綠Methylgreen顯示DNA法⑵甲綠派若寧Methy green-Pyronin顯示DNA和RNA法⑶菊花青鉻明礬(GC)顯示核酸法⑷丫啶橙Acridine Orange顯示DNA和RNA法 ⑸ 核酸提取法
