《S100B在肺癌腦轉移中的作用和機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由張賀龍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：S100B在肺癌腦轉移中的作用和機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張賀龍
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肺癌腦轉移是嚴重影響肺癌患者生存的因素，血腦屏障的存在使腦轉移的發生和治療都具有特殊性，使肺癌腦轉移患者的預後非常差。對肺癌腦轉移機理的深入研究是探索肺癌腦轉移新的預防和治療方法的基礎和前提，具有非常重要的意義。S100B在腦組織中含量豐富，在我們篩選出的肺癌腦轉移肺癌細胞株中也發現有高表達，我們推測其可能與肺癌腦轉移的發生有密切關係。我們擬套用細胞培養、基因轉染、miRNA干擾和動物實驗等，對S100B在A549、PC-14、PC-14/B三株轉移潛能不同的肺癌細胞株和臨床組織中的表達情況進行檢測，再藉助先前成功建立的特異的肺癌腦轉移動物模型，從過表達外源基因和siRNA抑制表達兩方面，對S100B在肺癌腦轉移中的作用和機制進行深入研究，探索肺癌腦轉移的機理，為研發肺癌腦轉移預防和治療的新方法奠定基礎。
結題摘要
根據所申請的課題內容，套用多種方法，從不同的層面對S100B與肺癌腦轉移的關係和機制進行了研究，取得了預期的研究結果，按標書所寫要求，較好的完成了課題，具體如下： 1、套用免疫細胞化學方法，不僅進一步證明了S100B在腦轉移肺癌細胞系PC14/B中高表達，還檢測到VEGF和MMP-9在PC14/B中高表達。 2、套用RT-PCR和western blot從RNA和蛋白水平，證明了S100B在腦轉移細胞系PC14/B中高表達，而在不發生腦轉移的PC14及A549中低表達，從不同的層面確證了S100B在肺癌腦轉移細胞系PC14/B中高表達。 3、通過粘附、遷移和侵襲能力試驗，顯示PC14/B的粘附、遷移和侵襲能力明顯強於PC14細胞和A549細胞，這也可能與PC14/B發生腦轉移有關。 4、用ELISA法檢測了30肺癌病人血清中S100B的表達。顯示發生肺癌腦轉移的病人血清中S100B的表達明顯高於非腦轉移的病人，也提示S100B可能與肺癌腦轉移有關，並具有一定臨床的意義。 5、通過載體構建、基因轉染等方法，採取下調和上調S100B在特定肺癌細胞中的表達，觀察不同的肺癌細胞的多個生物學行為的改變，確定了S100B對肺癌細胞增殖、侵襲、轉移等多種生物學特性的影響。 6、用流式細胞儀檢測了轉染正義和反義質粒後肺癌細胞的周期和凋亡的影響，結果顯示：下調S100B 表達的肺癌細胞G1期細胞增多，S期細胞減少。相反，S100B上調的細胞G1期細胞減少，S期細胞增多。 7、探索了S100B對肺癌腦轉移作用的可能機制。發現轉染S100B後，細胞形態由圓形向梭形改變，並出現侵襲性偽足。進一步發現支架蛋白IQGAP1在S100B促進肺癌轉移的過程中可能發揮重要作用。還發現S100BsiRNA干擾細胞株中凋亡相關蛋白Bcl-2和Bcl-xl的表達量均下調。 8、採用裸鼠左心室注射的方法，分次分批觀察了干擾下調PC14/B肺癌細胞中S100B後，肺癌腦轉移發生情況的變化；觀察了轉染上調肺癌細胞PC14的S100B後，其產生的腦轉移的發生情況，進一步驗證S100B對肺癌腦轉移發生的作用。 9、培養研究生4名（博士2名，碩士2名），已發表SCI論文3篇，中文核心期刊3篇。還有2篇SCI論文待發表。 10、所申請經費按要求合理支付完畢。
