《RNAi抑制CPNE1表達對骨肉瘤細胞的影響及相關機制研究》是依託江蘇大學，由蔣臻歡擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：RNAi抑制CPNE1表達對骨肉瘤細胞的影響及相關機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：蔣臻歡
- 依託單位：江蘇大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
骨肉瘤是臨床常見的成骨性惡性腫瘤，多見於兒童和青少年，其惡性程度高，易復發和轉移，預後差，骨肉瘤發病機制至今尚未明了。近年來，對骨肉瘤的發生機制在分子水平上有了許多新認識，但尚未見到有關CPNE1在骨肉瘤研究方面的報導 。在前期試驗中本課題組發現抑制CPNE1基因表達可顯著抑制骨肉瘤Saos-2細胞的增殖和EGFR表達。本研究首先探討骨肉瘤組織中CPNE1和EGFR 的表達及臨床意義，然後通過細胞體外及動物體內試驗，利用慢病毒介導的RNA干擾技術抑制CPNE1基因的表達，研究CPNE1在骨肉瘤細胞中的生物學功能並探討潛在的機制,該研究將為骨肉瘤以後的研究和治療提供實驗基礎。
結題摘要
骨肉瘤是最常見的主要發生在兒童和青少年的骨惡性腫瘤。CPNE1蛋白是一個高度保守的鈣依賴性磷脂結合蛋白，作用於調節信號轉導與膜轉運。在本課題研究中，我們研究了CPNE1在骨肉瘤組織和細胞中的表達，並研究了小干擾RNA（siRNA）錨定CPNE1後，對骨肉瘤細胞的增殖、轉移和化療敏感性的影響。結果表明:1.CPNE1在骨肉瘤組織和細胞系中有高表達。2.功能實驗證實，CPNE1基因敲除後可以顯著抑制骨肉瘤HOS、Saos-2細胞的增殖、集落形成、侵襲轉移。3.Western blot分析表明，CPNE1沉默後可下調與腫瘤發生、發展相關的許多蛋白的表達，包括Ras, MEK-1/2, WNT1, β -catenin, cyclin A1, IRAK2 和 cIAP2. 4.CPNE1下調增強了骨肉瘤Saos-2細胞對順鉑和阿黴素的敏感性。本研究觀察了CPNE1在骨肉瘤組織中的表達並揭示表達的臨床病理意義。觀察CPNE1對骨肉瘤細胞生物學行為的影響並闡明可能的作用機制。為尋找骨肉瘤新腫瘤標誌物和治療靶點提供一些實驗依據和理論基礎。為臨床套用慢病毒介導的CPNE1沉默治療骨肉瘤提供了進一步的認識，並且為治療骨肉瘤患者提供了用藥參考。
