《RNA結合蛋白QKI調控團頭魴糖異生作用的分子機制研究》是李向飛為項目負責人，南京農業大學為依託單位的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：RNA結合蛋白QKI調控團頭魴糖異生作用的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李向飛
- 依託單位：南京農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
糖類較為廉價，且具有節約蛋白質的作用。但受生理條件限制，魚類對糖類的利用率相對較低。研究表明，魚類糖代謝障礙可能是由糖異生作用調控的缺失或受損所致，但潛在機制尚不明確。項目組前期通過轉錄組分析，確定RNA結合蛋白QKI和SIRT1與魚體糖異生作用密切相關，但二者間的相互作用及QKI介導的轉錄後調控在魚體糖異生調節中的作用尚不清楚。本項目以體外培養團頭魴肝細胞為研究對象，利用RNA干擾及質粒轉染技術，明確QKI在魚體糖異生調節中的作用；在細胞水平上干擾SIRT1活性，進而探討其介導的去乙醯化修飾對QKI轉錄活性的調控作用，並利用RNA免疫沉澱技術確定QKI靶分子；在此基礎上，添加不同濃度葡萄糖，誘導肝細胞糖異生強度發生變化。通過QKI介導的基因轉錄後調控的變化，初步闡明其對魚體糖異生作用的調控機理，以期部分揭示魚類糖代謝障礙的分子機制，並為高糖飼料的研發和套用提供參考。
結題摘要
糖類來源廣泛、價格低廉，是最經濟的能量物質。在飼料中添加一定糖類，可以節約蛋白質和脂肪用量，進而降低飼料生產成本。但受生理條件限制，魚類對糖類的利用率相對較低。研究表明，魚類糖代謝障礙可能是由糖異生作用調控的缺失或受損所致，但潛在機制尚不明確。研究表明，RNA結合蛋白可能在機體糖異生作用中發揮重要作用，但相關機制尚不明確。基於此，本項目進行了如下研究：（1）克隆出了團頭魴QKIa全長序列，明確了其功能位點、保守性及組織分布規律；（2）通過激素負荷改變魚體糖異生強度，探討了QKIa及糖異生相關基因表達變化，初步闡明了QKIa與糖異生途徑間的相關性；（3）通過葡萄糖負荷和高糖脅迫抑制魚體糖異生途徑，探討了QKIa表達變化，進一步驗證了其在糖異生中的作用；（4）結合體內、外試驗，初步明確了SIRT1對QKIa活性的調控作用，闡明QKIa活性調控的上游機制；（5）初步篩選出了QKIa下游分子，確定了QKI調控魚體糖異生作用的分子途徑；（6）探討了不同糖異生強度下，肝細胞中QKIa及其下游基因表達變化，確定了QKIa調控魚體糖異生作用的分子機制。在完成項目既定目標之外，還進行了部分拓展工作，初步明確了白藜蘆醇和煙醯胺通過SIRT1調控QKIa進而改善高糖脅迫團頭魴血糖穩態的分子機制，篩選出了魚類糖代謝調控物。上述研究初步闡明了QKIa調控魚體糖異生作用的分子途徑，部分揭示了高糖脅迫導致魚類糖代謝障礙的分子機制，為魚類營養代謝障礙研究提供了新的思路和借鑑，並為高糖飼料在水產養殖中的套用提供了指導。
