Percoll分層液

Percoll分層液屬於Perco，是經過聚乙烯吡咯烷酮 (polyvinyl pyrolidone, PVP) 處理的矽膠顆粒混懸液，為ll分層液。

基本介紹

• 中文名：Percoll分層液
• 外文名：Percoll layered liquid
• 屬於：Perco
• 分類：ll分層液

簡介

Percoll是經過聚乙烯吡咯烷酮 (polyvinyl pyrolidone, PVP) 處理的矽膠顆粒混懸液，對細胞無毒性和刺激性。Percoll混懸液的矽膠顆粒大小不一，經過高速離心後，可形成一個連續密度梯度，將比重不同的細胞分離純化。

將1份10XPBS與9份Percoll貯存液混合，製成等滲Percoll懸液，此懸液被認為是100%Percoll懸液，其密度為1.1294g/ml。用PBS或細胞培養液稀釋100%Percoll而獲得所需密度的Percoll分離液用於相應細胞的分離。若分離淋巴細胞應使用1.0777g/ml，配製時用稀釋液稀釋60%即可。

取比重1.077的Percoll分離液X ml與離心管中，將等倍稀釋的抗凝血1/2 X ml 小心疊加在分離液上，經水平離心（1500rpm）後，便得四個細胞層，從而分離出淋巴細胞。表層為死細胞殘片和血小板，底層為粒細胞和紅細胞，中間有兩層，上層富含單核細胞，下層富含淋巴細胞。

優點

該法是純化淋巴細胞和單核細胞的一種較好的方法，淋巴細胞純度高達98%，單核細胞純度可達78%。

因為Percoll具有滲透性低、不穿透細胞、粘度低、密度高和無毒害等優點，與目前常用的密度梯度離心介質，包括蔗糖（Sucrose）、血清白蛋白（Serum albumin, ALB）、聚蔗糖（Ficoll）、氯化銫（CsCl）等相比，是目前較理想的介質。Percoll密度梯度離心已被多次成功地用於動物細胞及其細胞器的分離，純化了包括人血液細胞、骨髓細胞、紅血球細胞、白血球細胞、淋巴細胞、肝細胞等在內的十餘種動物細胞。這一技術也開始用於用於分離和純化植物原生質體、核、葉綠體和線粒體。