PgD

PGD(preimplantation genetic diagnosis)，即移植前基因診斷，也就是第三代“試管嬰兒”。主要用於檢查胚胎是否攜帶有遺傳缺陷的基因。

它是在試管嬰兒技術基礎上出現的，精子卵子在體外結合形成受精卵，並發育成胚胎後，要在其植入子宮前進行基因檢測，以便使體外授精的試管嬰兒避免一些遺傳疾病。目前植入前遺傳診斷能診斷一些單基因缺陷引發的疾病，比如說血友病、地中海貧血症等疾病，即可通過此類診斷直接發現。

基本介紹

• 中文名：移植前基因診斷
• 外文名：PGD(preimplantation genetic diagnosis)
• 別名：第三代“試管嬰兒”
• 用途：檢查胚胎是否攜帶有缺陷的基因

簡介

種植前基因診斷還適用於年齡超過35歲的婦女篩選非整倍體，解決年長婦女因胚胎基因異常引起的不孕或流產；對平衡易位的夫婦選擇基因平衡的胚胎進行移植。從根本上提高第一、二代“試管嬰兒”的妊娠成功率，降低自然流產率，提高妊娠質量，可有效地避免因盲目地移植了攜帶異常基因的胚胎而不得不在孕期終止妊娠。

卵細胞染色體數目錯誤可能會導致胚胎流產，或導致唐氏綜合徵之類的嚴重嬰兒病症。年輕婦女多達一半的卵細胞以及年屆39歲以上婦女75%的卵細胞會有染色體異常現象。

原理

一個健康的卵細胞含有46個染色體，排列成23對，但在卵細胞可以受精之前，先要進行一次減數分裂，每對染色體一分為二，其中不需要的一組23個染色體被排出卵細胞，形成一種稱為極體（polarbody）的結構。該檢測是指從體外受精的胚胎中取1到數個細胞或者取卵細胞的第一極體在種植前進行基因分析，可用以鑑定胚胎性別，分析胚胎染色體，然後移植基因正常的胚胎，從而達到優生優育的目的。1990年報導了首例套用種植前基因診斷鑑定性別後，選擇女性胚胎移植入得以妊娠。①

這種孕前基因診斷(PGD)的胚胎分析技術，已經使用了數年，用於鑑定那些父母有遺傳病史的胎兒是否有不健康的跡象，比如膽囊纖維化或者血友病等等。但是現在，美國少數婦產科專家使用這一技術讓父母選擇可以改變寶寶一生的東西——性別。

費用

由維吉尼亞基因及人工授孕研究所提供的詳細資訊稱，利用PGD技術，截止到2002年11月已有300個嬰兒問世。臨床套用證明這項技術已日益成熟，產婦生男嬰的成功率達74%，生女嬰的成功率更高達91%。而在英國，儘管嬰兒性別篩選並不違法，但英國及歐洲大陸尚無診所提供類似服務。據悉，維吉尼亞基因及人工授孕研究所的收費一般為每對夫婦4000英鎊(約合4.8萬元人民幣)。③ 而在中國，PGD手術的費用約為40000元人民幣。④

適應症

然而PGD技術真正是一項幫助人們實現美夢的完美技術嗎？對於這個問題，一些專家對此有著不同的意見。PGD是一個檢查早期胚胎的一個單細胞的不正常基因的程式。這個程式有時候可能直接就引起胚胎的死亡，這對一個成型的生命來說並不公平，理論上講，甚至屬於謀殺行為，應該受到譴責。

PGD實際上側重於胚胎著床前的遺傳診斷，經過體外授精獲得胚胎。人群中有1/5―1/4患有遺傳性疾病，平均每人攜帶5―6個隱性基因，若能夠在胚胎移植前就明確有無遺傳性疾病，將會大大提高出生後嬰兒的質量。當然，這說說容易，做起來卻十分困難。因為全世界遺傳性疾病有4000餘種，而目前第三代試管嬰兒的產前診斷僅為10餘種，還難以保證日後孩子的質量。

胚胎植入前遺傳基因診斷,簡稱PGD,是試管受精IVF“第一代試管嬰兒”或者ICSI“第二代試管嬰兒”周期中使用的一種生殖技術，也稱PGD為“第三代試管嬰兒”胚胎移植前基因診斷（PGD,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）是在試管嬰兒治療周期中用來確定胚胎的基因是否異常.基因診斷還可以用來幫助鑑別胚胎性別,即可以進行性別篩選（性別選擇）以作為協調家庭平衡的一種方式.。PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）一般用於夫妻一方或雙方的父母都是已知遺傳性疾病(如血友病或囊性纖維化)的攜帶者.。PGD通常是用在準備用試管方式懷孕的女方卵子被採集並和男方的精子受精之後形成胚胎,在胚胎移植進女方子宮之前進行.當胚胎髮育到四至八個細胞的階段時,利用顯微外科技術將胚胎中的一個或兩個細胞(稱為卵裂球)取出.然後將細胞中的DNA加以分析,以檢查其是否有遺傳性疾病.如果有任何異常,其檢驗結果將被告知患者.然後,由患者來決定將哪些胚胎進行移植.在移植前做出您的選擇.我們建議,病人及其家屬在進行基因診斷前討論其可能產生的結果,這使他們有足夠的時間去考慮所有會產生的問題.還有其他方法可以在產前診斷染色體方法,如羊水穿刺術或絨毛膜取樣法(CVS)則是從懷孕母親身體採集樣品.如果診斷結果顯示胎兒已經受到影響,夫婦需要做出是否終止妊娠的決定.有些夫婦可能需要經過多次嘗試來誕生一個健康的嬰兒.而PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）是用來檢查早期胚胎(在移植前的幾天)是否遺傳性疾病.夫妻可以選擇那些健康的胚胎來移植,並確定由此誕生的嬰兒是健康的.相比羊水穿刺術和絨毛膜取樣(CVS),基因檢測的優勢在於它使患者有能力在懷孕之前就了解胚胎的健康狀況,並可提前做出決定.

胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）可以檢測多種疾病,它們包括染色體異常,單基因缺陷或性連環性疾病.泰國威它尼國際醫院可以對胚胎特定的染色體進行檢測以檢查特別的疾病,包括:

13號染色體: 13號染色體異常多出現-三體綜合徵(帕韜綜合徵) 發病率大約為1/5000。是因為多了一條13號染色體導致患病，患兒有多發畸形，多數在出生後三年內死亡。13號染色體異常引起乳腺癌和卵巢癌,耳聾,肝臟及神經系統疾病。16號染色體: 家族性地中海熱、多囊腎病（腎臟出現大量囊腫）、腸功能失調。

18號染色體:18號染色體異常多出現三體綜合徵(愛德華綜合徵) 是一種嚴重的染色體異常，發病率為大約1/6000。患有18號染色體異常的三體綜合徵的患者通常表現為多個器官缺陷，大多在出生後一年內就死亡。常引起尼曼匹克病（貧血、肝、脾、淋巴結腫大、消化不良和神經性缺陷、胰臟癌等疾病。

21號染色體: 唐氏綜合徵（Down’ssyndrome)

22號染色體：骨髓被惡性白血球取代而得慢性骨髓細胞瘤。

X染色體: 杜氏肌營養不良症(DMD),特納氏綜合徵,脆性X綜合徵

Y染色體: 急性髓系白血病

正常的女性染色體型為XX 男性染色體為XY。而性染色體異常比較常見，發生率大約1/500，專家認為大約25%的自然流產是由於性染色體異常導致的。以下是三類常見的性染色體異常症狀：

特納綜合徵Tul'ner(先天性無卵巢綜合徵) 在女嬰中發病率為1/10000，是導致發生流產的最主要的染色體異常原因。患病女嬰沒有兩條X染色體，只有一條X染色體：45X。患者長大後身材矮小、頸部異常、性發育不全、卵巢異常小，常患有心臟和腎臟疾病。這些症狀往往到青春發育期才能被發現。核型為45，X。

克氏綜合徵(Klinefeher syn-drome)(先天性睪丸發育不全) 在男嬰中發病率約為1/1000，最顯著的特徵就是男孩達到青春期後身型非常高大，四肢細長。患兒有一條多餘的X染色體，核型為47XXY，常常表現為性發育不全，睪丸小,不能產生精子，故不育。陰毛呈女性發布，鬍鬚，腋毛，陰毛稀少，無喉結，皮膚細膩，部分男性患者有女性的乳房。

混合性性發育不全（Mixde gonadal dysgene-sis,MGD)也稱為，XO/XY性發育不全，是一種綜合，最顯著的特徵是患者陰蒂增大。性的發育程度影響內外生殖器官的發育。

XXX綜合症（Trisomy x syndrome）是女性最常見的染色體異常。對性分化影響不大，患者一般外表正常，部分患者有智力障礙和精神障礙，卵巢功能異常，間歇性閉經，乳房發育不良。XXX綜合症的染色體核型有47，XXX; 48,XXXX等，染色體的多少與症狀的嚴重程度有關，X染色體越多，症狀就越嚴重。

脆X綜合徵（Fragile x chromosome） 是男患者發生智力發育遲緩的最主要原因，病症表現在前額前突，下頜前突，大耳、大手和語言障礙，性格孤僻。核型為46，Fra(x)Y。

過程

PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）的過程： PGD的診斷步驟通常包括誘導排卵、取卵、受精、受精卵體外培養等IVF"第一代試管嬰兒"或者ICSI“第二代試管嬰兒”的整個過程。

1 配合施行試管嬰兒的治療，將男方(供精方)的精子與女方（供卵方）的卵子受精細 胞分裂發育成胚胎。

2 將胚胎置放於特定溫度的保溫箱內培育3天，胚胎將會分裂至四至八個子細胞。

3 利用顯微操作技術在胚胎的透明帶上打洞，利用微細導管將胚胎中的四至八個子細 胞取出一到兩個細胞（卵裂球）來作基因鑑定。

4 若胚胎無異常，再將胚胎繼續培養植入子宮內等待著床。A.螢光原位雜交法(Fluorescent in-situ hybridization, FISH)螢光原位雜交法其原理是在不破壞DNA鏈狀結構的原則下,將DNA鏈原位分開,並以螢光劑或放射離子的DNA探針與之結合,便可在顯微鏡下直接觀察細胞或染色體中是否存有此DNA探針所對應的序列,而作出診斷。使用染色體13,16,18,21,22 ,x及y之DNA探針，一次檢查胚胎是否有上述這些染色體數目及結構的異常。因為它只在一兩個胚細胞上進行，並且必須在48小時內完成，以使得胚胎能夠在第5天被移植。因為在此前，需要花時間進行標準染色體分析，採用的是被稱為螢光原位雜交(FISH)方法。

每個染色體都有DNA存在的獨特區域，並僅僅出現在那個特定染色體上。當一根小DNA探針接觸到該DNA區域時，可被用於認識這些獨特的模式和螢光或發亮。每根探針能發幾種不同顏色的光，使得幾個染色體（或染色體的區域)可以同時被測試。這個技術被稱為FISH螢光原位雜交技術。可以為染色體13，16，18，21，22，X和Y進行FISH測試，因為這些染色體最容易發生變異。一個正常細胞每個被編號的染色體都應該顯示2個FISH信號(或光)，其中女性為2個X信號或男性為1 X和1個Y信號。 只有五種不同顏色可以被使用，因此大多數測試分兩部分來做。前5染色體被測試後，洗滌探針，然後對剩下的染色體進行測試。洗滌過程可能影響染色體的完整性，每個細胞最多使用兩個FISH周期，因此恆健醫療旅遊的泰國胚胎專家建議一般情況下對染色體的測試不超過5個。染色體原位雜交(FISH)技術的引入，讓我們實驗室擴大了PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）的診斷範圍，特別是間期核單細胞FISH技術的成功，以及多種多樣FISH探針的開發，把PGD擴展到了染色體病的診斷。

（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）FISH.螢光原位雜交法(Fluorescent in-situ hybridization, FISH)的步驟：FISH簡要流程。一般每個卵裂球細胞只能標記5條染色體，約需5個多小時。 *固定卵裂球細胞於玻片上; *細胞裂解; *脫水; *螢光標記探針，並使之與卵裂球染色體雜交; *漂洗除去背景染料; *加入二氨基苯基吲哚(DAPI)負染(counterstain)，在螢光顯微鏡下觀察。 FISH技術在PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）中的套用胚胎性別的鑑定,排除性連鎖疾病的發生。對於X連鎖隱性遺傳病,通過FISH技術鑑定性別,防止後代相應遺傳病的發生。染色體疾病包括數目和結構的畸變。3、FISH技術在PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）的套用中還存在的局限性（1)受DNA探針螢光素染料的限制,每個卵裂球只能用2～5個探針分析染色體, 限制了染色體數目的分析。 （2)FISH技術進行PGD時受時間和卵裂球數目的限制,用單卵裂球進行FISH時,3%的卵裂球會沒有信號及出現5%的錯誤結果。 （3)FISH技術的實驗條件要求較高, 操作過程中的任何一個小的失誤均可導致嚴重的臨床後果採用單細胞快速製備中期染色體的方法，結合多種FISH技術，如多重雜交FISH技術、光譜核型分析、比較基因組雜交等，大大地提高了PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）檢測的準確性和有效性。比較基因組雜交(comparative genomic hybridigation,CGH)是一種與FISH相關的技術。將來自待測標本的DNA用綠色螢光標記，來自原來已測的正常核型的DNA用紅色螢光標記。這兩組DNA同時與一個玻片上的正常中期染色體雜交。若樣本中無染色體不平衡（如綠色DNA與紅色DNA核型相同），兩種顏色的DNA片段平等地競爭染色體上的雜交位點。紅色、綠色DNA等量雜交產生黃色，但若測試樣本中含有多餘的染色體，如21三體，這條染色體的綠色DNA片段多於紅色，這種效果可產生微綠的顏色，相反，若測試樣本中染色體缺失，這條染色體的紅色DNA片段多於綠色，就產生微紅的顏色。複雜的計算機分析軟體可計算每條染色體全長紅：綠的精確比率。CGH還可測出易位攜帶者CGH套用於PGD的主要障礙是DNA的量。多數方法要求100ng-1ugDNA，這是超過10000個細胞的DNA量。PGD只有1-2個細胞，用於CGH前需要整個基因組擴增。CGH最近成功地套用在卵裂球檢測。

顏色 Chromosome染色體 Red紅色 =13 Aqua淺綠色=16 Blue藍色=18 Green綠色=21 Gold金色=22 一個正常的FISH非整倍性測試，顯示每個被測試染色體都有兩個相同的顏色。一個許多夫婦都關心的問題是基因診斷是否會影響到他們的懷孕,更重要的是,是否會影響到他們胚胎的健康?由於基因檢測是在胚胎繁殖早期所進行的,此時任何細胞都可以從胚胎中取出的,而不會對胚胎髮育造成任何損害.更有異議的是,在某種程度上基因診斷會影響您成功懷孕的機率.研究報告指出基因診斷和妊娠成功率之間沒有任何聯繫,一些結論指出它減少了懷孕的可能性而另外一些則認為其增加了懷孕的機率

常見問題

（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）是否安全？

是的.多年的試驗和對出生的嬰兒進行統計，表明PGD不會導致先天缺陷或染色體變異的增加。PGD在胚胎的基因物質‘活躍’之前進行，因為它做的很早，胚胎裡面的所有細胞仍然是相同的，並且每個細胞都能夠發育成為胎兒的任何部分。去除早期胚胎的細胞不會改變胚胎髮育成為一個完整正常妊娠的能力。

（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）的準確性?

雖然基因檢測是一個重要的診斷工具,但它並不是沒有任何限制.單細胞的基因分析對技術要求很高且容易出現一些錯誤.螢光原位雜交基因檢測(PGD-FISH)只能測試數量有限的染色體,其餘的異常染色體則無法檢測.聚合酶鏈式反應基因檢測(PGD-PCR)有時會無法檢測單個基因缺陷.對於染色體易位,基因檢測無法檢測已知的參與易位的異常染色體以外的其它染色體.基因檢測對於染色體異常的檢測錯誤率約為10%.對於嵌合型染色體,其特定的異常基因可能存在於胚胎的一個細胞中,而不是另一個細胞,這對於基因診斷來說往往是不夠充分的.另一方面,由於基因診斷的局限性,有診斷結果可能顯示所有胚胎都不正常,但實際上其中一個胚胎可能是正常的

PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）優點?

PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）是對胚胎以上的最易有染色體變異的部位進行測試，可以篩選出正常的胚胎懷孕。經過PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒）篩選的胚胎在子宮著床的機率更大，更少的自然死亡率，同時也減低了生出有異常染色體的後代的風險（如唐氏綜合徵等），PGD（胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定，第三代試管嬰兒技術可減少遺傳悲劇發生PGD技術讓胚胎專家可以在試管嬰兒療程中胚胎尚未植入的階段，即能診斷出胚胎是否帶有遺傳疾病基因。透過PGD對遺傳異常胚胎的篩選，可以增加健康胚胎著床率，減少自發性流產和三倍體染色體異常的發生

PGD(胚胎移植前基因診斷,染色體鑑定,第三代試管嬰兒)性別篩選/性別選擇?

每次懷孕都有50%機會是男性和50%機會是女性，但有些家庭有相同性別的孩子更多一些。使用PGD可以幫助這些夫婦獲得他們家庭中人口偏少的性別的孩子可以協調和平衡家庭人口性別。試管嬰兒的技術已為時多年，但要篩選嬰兒的性別在許多西方國家是受到法律的限制的，而在泰國是沒有受到法律的限制，在胚胎植入之前，可以選擇生男生女。當性別篩選成功的妊娠，所選的性別準確度可以達到100%