《PDGFR和Rb-E2F信號通路在EGFR-TKIs獲得性耐藥機制中的作用研究》是依託天津醫科大學，由陳軍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：PDGFR和Rb-E2F信號通路在EGFR-TKIs獲得性耐藥機制中的作用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳軍
- 依託單位：天津醫科大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
EGFR-TKIs（吉非替尼和厄羅替尼）的獲得性耐藥是制約其療效的主要難題。在前一個國家自然基金（30972963）的資助和大量前期工作的基礎上發現PDGFR和Rb-E2F信號通路可能參與EGFR-TKIs獲得性耐藥的發生。本研究擬通過檢測多個EGFR-TKIs敏感程度不同的肺癌細胞株中Rb-E2F通路和PDGFR及其相關通路中關鍵分子的表達變化情況，探討PDGFR和Rb-E2F信號通路的改變與EGFR-TKIs獲得性耐藥的相關性；套用基因轉染和siRNA干擾等技術進一步分析PDGFR 和E2F1等靶基因在EGFR-TKIs耐藥中的的作用機制；利用PI3K和MAPK等相關信號通路抑制劑的干預和裸鼠腫瘤移植模型，進一步在體內外探討PDGFR 和Rb-E2F通路與EGFR信號通路在吉非替尼獲得性耐藥發生過程中的互動作用。為闡明EGFR-TKIs獲得性耐藥的分子機制提供有效的理論基礎和實驗依據。
結題摘要
本項目按原計畫執行並完成任務。首先完成PC-9及其子系耐藥細胞株中Rb-E2F信號通路相關分子狀態的檢測和在吉非替尼處理後，Rb-E2F1通路相關分子的變化情況，以及旁路絡氨酸激酶(如PDGFR)相關信號通路中主要基因的變化情況。發現Rb-E2F1信號通路的關鍵基因如Rb和E2F1在PC-9獲得性耐藥細胞株中表達異常，與旁路信號通路激活導致EGFR-TKIs獲得性耐藥有關。套用基因轉導技術分別將PDGFR siRNA、E2F1siRNA和相應的基因等導入上述相關細胞株中，發現沉默上述相關基因後，能夠在PC9獲得性耐藥細胞株中逆轉EGFR-TKIs的耐藥，初步探討了E2F1及其相關的信號通路的變化和細胞對吉非替尼耐藥性的改變情況，進一步證實Rb-E2F1信號通路在EGFR-TKIs獲得性耐藥中發揮重要作用。進一步分別聯合套用人工合成的CDK4/6的抑制劑（PD-0332991）在體外不同耐藥細胞株和體內動物模型中，探討了聯合套用CDK4/6抑制劑與EGFR-TKIs後在逆轉TKIs獲得性耐藥中的作用，在體內外證實CDK4/6抑制劑與EGFR-TKIs聯合後能夠逆轉EGFR-TKIs獲得性耐藥，並把相關發現申請了國家發明專利（2015101004216）；最後在肺癌組織標本中研究PDGFR和Rb-E2F通路的關鍵分子，如Rb，E2F1及其他家族成員，CDK4/6等基因的存在狀態，表達水平以及與肺癌患者的臨床預後的關係。初步發現KRAS, EGFR，EML4-ALK在肺癌中的異常和存在狀態，報導了中國人群中EML4-ALK融合基因的陽性率和臨床特徵，並首次報導EML4-ALK肺癌患者存在腫瘤異質性；分析了EGFR外顯子19缺失和21突變患者的臨床特徵以及其他肺部腫瘤患者的Driver基因的異常情況，為逆轉EGFR-TKIs獲得性耐藥提供了新思維和新方法。該項目目前共發表科研論文17篇，其中SCI收錄7篇；獲得和正在申請國家專利各1項，獲得天津青年科技獎1項，培養研究生15名。
