《TOPK磷酸化c-Jun促進EGFR-TKIs耐藥肺癌細胞生長的分子機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由李聖青擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：TOPK磷酸化c-Jun促進EGFR-TKIs耐藥肺癌細胞生長的分子機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李聖青
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
非小細胞肺癌對EGFR-TKIs的多重原發和繼發耐藥是目前急需攻關的難題。TOPK是新發現的參與有絲分裂紡錘體形成的重要激酶。本課題前期研究發現EGFR-TKIs不敏感的肺癌細胞株和肺癌組織都存在TOPK高表達現象，在耐藥A549細胞阻斷TOPK表達可顯著減少軟瓊脂中的克隆數。進一步研究發現TOPK可以和c-Jun相結合，體外磷酸化分析表明TOPK可以磷酸化c-Jun。因此本課題著重研究TOPK磷酸化c-Jun的具體分子機制；這些磷酸化位點對c-Jun的功能調節以及AP-1轉錄活性的影響；c-Jun靶基因的鑑定及初步生物學功能研究；確立TOPK通過c-Jun促進TKIs耐藥肺癌生長的細胞表型；採用裸鼠模型，觀察阻斷TOPK和c-Jun對A549細胞皮下成瘤的影響。本課題豐富了TKIs耐藥肺癌細胞生長的分子機制，為肺癌生物治療提供了TOPK這一新靶點。
結題摘要
肺癌是嚴重威脅人類生命健康的重大疾病，也是全球癌症相關性死亡的首要原因，其中NSCLC約占85%。當前，表皮生長因子受體-酪氨酸激酶抑制劑（EGFR-TKIs）在NSCLC治療方面獲得了巨大的成功，已發展成為肺癌治療的一線藥物。儘管如此，臨床中大部分EGFR突變陽性患者經過一段時間的治療後對EGFR-TKIs產生繼發性耐藥，因此對EGFR-TKIs獲得性耐藥機制及其臨床應對策略的研究成為靶向治療領域的又一研究熱點。現有研究表明，非小細胞肺癌EGFR-TKIs獲得性耐藥機制主要表現為細胞繞過EGFR直接通過其下游分子來激活肺癌細胞生長的信號通路。因此，越來越多的研究者開始關注EGFR信號通路的下游分子以及與肺癌生長密切相關的一些蛋白激酶，以克服EGFR-TKIs的耐藥問題。 TOPK是一種由322個胺基酸構成的絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶，首次發現於淋巴因子激活的殺傷性T細胞。以往研究表明，TOPK與有絲分裂期間紡錘體的功能密切相關，TOPK的敲除將導致細胞胞質分裂的推遲。近年來的研究發現，TOPK在多種腫瘤細胞中呈強表達，與腫瘤的發生髮展密切相關。TOPK與細胞內多個凋亡相關蛋白的活化和表達有關，參與調控細胞的凋亡。已有研究發現，穩定干涉TOPK表達後，可以對細胞內的一些凋亡相關蛋白以及細胞周期蛋白的表達水平產生不同程度的影響，提示TOPK可能在癌症耐藥過程中具有重要的作用。AP-1是一個二聚體的轉錄因子，包含可以與DNA結合的亮氨酸拉鏈結構域。Jun（c-Jun，JunB 和JunD）和Fos（Fos，FosB，Fra-1，Fra2）亞家族是主要的AP-1蛋白。現有證據表明，AP-1在腫瘤細胞的增殖、轉化等方面發揮了重要作用。c-Jun是癌基因，c-Jun活化後可以調節靶基因轉錄，從而參與細胞的生長、分化和凋亡等多種生理過程。c-Jun的調節與AP-1的轉錄活性密切相關。但c-Jun已知最主要的調節蛋白是JNK（c-Jun amino-terminal kinase，c-Jun氨基末端激酶）。JNK是絲裂原激活的蛋白激酶超家族成員，JNK接受上游信號後被激活，從而與c-Jun結合併且磷酸化2個絲氨酸/蘇氨酸叢，Ser63/73和Thr91/93，進而激活c-Jun增強其轉錄活性。c-Jun磷酸化後轉錄活性增強，蛋白的半衰期顯著延長。但是JNK只在各種應激狀態下被激活，
