《P2-HNF4α促進肝癌細胞增殖的分子機制》是依託中山大學，由雲徑平擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：P2-HNF4α促進肝癌細胞增殖的分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：雲徑平
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
肝細胞癌惡性度高，預後差，其發生髮展機制尚未明了。已有研究表明P1啟動的HNF4α（P1）在抑制腫瘤細胞增殖中有重要作用。我們前期觀察到P2啟動的HNF4α（P2）在肝癌細胞中高表達，且與P1表達負相關，並受啟動子甲基化修飾調控；統計分析提示P2表達與肝癌分化程度及預後相關；實驗表明沉默P2表達抑制肝癌細胞增殖。因此，我們提出P2與P1功能不同，並促進肝癌細胞增殖的假說。本項目擬採用一系列分子細胞生物學及免疫學實驗技術，利用過表達或敲除P2的細胞和動物模型，在蛋白表達調控及細胞功能上，明確P2在肝癌中的表達及其臨床意義，揭示P2在肝癌中高表達的調控機制，尋找P2促進細胞增殖的作用通路，探討P2在肝癌細胞生長中的作用及其分子機制，並闡明P2在肝癌細胞分化中的作用，從而獲得P2參與肝癌細胞增殖和分化的可靠證據，為詮釋肝癌發生髮展的分子機制和尋找肝癌治療新靶點提供充分的科學依據。
結題摘要
肝細胞癌惡性度高，預後差，其發生髮展機制尚未明了。已有研究表明由不同啟動子介導的不同基因轉錄本在腫瘤惡性進展中可能發揮重要作用。文獻報導HNF4α存在兩個啟動子：P1和P2。由P1啟動子啟動的HNF4α (P1)在抑制腫瘤細胞增殖中有重要作用，但是，我們採用qRT-PCR, western blot, IHC等技術在615例肝癌樣本中的研究結果提示由P2啟動子啟動的HNF4α (P2)在肝癌細胞中高表達，與P1表達負相關；統計分析提示P2表達與肝癌分化程度及預後相關。在研究P2生物學功能時，我們利用裸鼠模型，在體內檢測P2是否能促進腫瘤生長。實驗順利開展，但實驗結果並未能符合實驗預期結果：在多次的體內外實驗中，過表達P2或者沉默P2表達未能影響肝癌細胞的克隆形成能力、細胞遷移及體內成瘤能力。因此，課題組決定修正項目研究內容，轉向尋找鑑定與肝癌發生髮展密切相關的其他分子標記物。通過8對肝癌及其癌旁組織進行轉錄組測序分析，我們鑑定並驗證出Zic2, AIM2, LRG1, PKM2, Bad, miR-137等多個基因在肝癌中表達異常，並闡述這些基因在肝癌中的表達，意義，生物學功能及其作用機制。在本項目的資助下，課題組共發表SCI論文10篇，總影響因子45.26分，單篇最高6.375分；參加學術交流活動21人次；共培養博士研究生7名，碩士研究生1名。綜上所述，課題組能基本完成原研究內容，在高水平SCI雜誌上發表了數篇文章，達到了部分既定研究目標。
