《MicroRNA 146a在冠脈粥樣斑塊發生中的作用及其分子機制研究》是依託上海交通大學，由何裕嵩擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MicroRNA 146a在冠脈粥樣斑塊發生中的作用及其分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：何裕嵩
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
動脈粥樣硬化與microRNA的關係尚不明確。我們發現，人類冠脈粥樣斑塊組織存在microRNA差異性表達，其中miR-146a在人巨噬細胞源性泡沫細胞中也存在類似差異；microRNA 146a減少巨噬細胞內脂質含量；影響TLR2 、IRAK1、TRAF6、NF-kB和TNF-α的表達。這些初步研究結果提示MicroRNA 146a與巨噬細胞源性泡沫細胞形成和冠狀動脈粥樣硬化相關。為此，我們擬驗證miR-146a對TLR及其他相關通路分子表達的影響，利用螢光素酶報告體系尋找其直接影響的分子；利用apoE基因敲除小鼠建立動脈粥樣硬化動物模型，並檢測動脈粥樣斑塊組織中microRNA 146a的表達水平，繼而在體內過表達microRNA 146a，研究其與冠脈粥樣硬化發生的關係。
結題摘要
背景：動脈粥樣硬化是導致心腦血管疾病的主要因素，其核心致病原因即氧化的低密度脂蛋白（Oxidized low density lipoprotein， oxLDL）。血液中低密度脂蛋白（Low density lipoprotein， LDL）可被活性氧（Reactive Oxygen Species， ROS）等自由基氧化，形成氧化的低密度脂蛋白。其刺激單核細胞遊走進入血管壁，損傷血管內皮細胞，並被巨噬細胞吞噬，形成泡沫細胞，而泡沫細胞壞死崩解，形成糜粥樣壞死物，最終形成粥樣硬化斑塊。而巨噬細胞轉化為泡沫細胞這一病理過程中，涉及多種調控模式，包括巨噬細胞膜表面受體TLR4、相關細胞信號通路以及microRNAs (miRNAs)。目標：因此本研究旨在研究關鍵miRNAs在泡沫細胞形成及粥樣硬化發生中的作用。方法：本研究利用microRNA array、螢光素酶報告系統、脂質累積檢測以及蛋白質磷酸化晶片等細胞生物學手段進行研究。結果：（1）oxLDL刺激巨噬細胞後，2條（hsa-let-7c和hsa-miR-19b）表達上升，4條miRNAs（hsa-miR-1826、hsa-miR-132、hsa-miR-146a和hsa-miR-923）表達下降。（2）僅有miR-146a顯著性的抑制了巨噬細胞中脂質累積，同時miR-146a僅對TLR4（Toll like receptor 4）表達有抑制作用。（3）靶點預測以及螢光素酶報告系統檢測結果發現，TLR4是miR-146a直接的靶點基因，miR-146a直接作用於TLR4的3'-UTR區。（4）miR-146a抑制巨噬細胞的炎症反應，即拮抗oxLDL的效應，降低白介素6、白介素8、細胞因子配體2（CCL2）和MMP9的分泌。（5）蛋白質磷酸化晶片發現，miR-146a抑制巨噬細胞內多種信號通路激活，包括MAPK、Src家族以及NF-kB 等。同時miR-146a還抑制了TLR4下游分子TRAF6和IRAK1的表達。結論：在oxLDL誘導巨噬細胞向泡沫細胞轉化這一過程中，miR-146a通過直接抑制TLR4表達以及其下游信號通路，抑制轉化過程中最重要的兩個細胞事件－－胞內脂質累積以及炎症反應。科學意義：本研究闡明了miR-146a對於巨噬細胞向泡沫細胞轉化的作用機制，進一步揭示了動脈粥樣硬化發生和發展的病理機制。為將來預防和治
