《MUC1對食管鱗癌EMT過程中TGF-β信號通路的作用及調控機制研究》是依託山東大學，由劉相燕擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MUC1對食管鱗癌EMT過程中TGF-β信號通路的作用及調控機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉相燕
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
上皮細胞-間質細胞轉化（EMT）是惡性上皮腫瘤發生髮展的基礎，但人們對腫瘤細胞中誘導維持EMT狀態的信號機制並不十分清楚。TGF-β信號通路是腫瘤轉移過程中誘導EMT發生的一個關鍵通路，TGF-β與經典及非經典Wnt三條信號通路協同作用誘導激活細胞EMT程式，之後以自分泌的方式維持最終的間質細胞狀態。我們前期研究發現MUC1基因在食管癌組織及轉移淋巴結中存在高表達，與食管癌淋巴結隱匿性微轉移、食管癌術後早期復發及不良預後密切相關，最新研究亦發現MUC1能通過誘導癌細胞發生EMT而促其侵襲。本課題擬在前期工作基礎上以TGF-β信號通路為切入點，採用RNA干擾技術、高通量組學分析等方法深入研究MUC1基因調控對食管癌EMT轉變、侵襲轉移等生物學行為的影響，揭示食管癌細胞中控制、維持EMT的相關關鍵信號分子並闡明其調控機制，為食管癌的基因治療提供新的靶點和方向。
結題摘要
食管鱗癌是我國常見消化道腫瘤，作為一種高侵襲性惡性腫瘤，病人預後較差，約半數病人於術後2~3年內復發。我們前期研究發現MUC1基因在食管癌組織及轉移淋巴結中存在高表達，與食管癌淋巴結隱匿性微轉移、食管癌術後早期復發及不良預後密切相關。本研究旨在進一步明確MUC1在食管鱗癌中的表達及其在食管鱗癌侵襲轉移過程中的功能，並初步探索其作用機制。本研究通過免疫組化方法進一步檢測MUC1在食管鱗癌中的表達並分析其與臨床病理及預後的關係。同時通過構建MUC1過表達及shRNA抑制食管鱗癌細胞系分析MUC1對食管鱗癌生物學行為的影響。並分析MUC1在食管鱗癌細胞系EMT過程中發揮的作用。本研究通過免疫組化方法及qRT-PCR檢測93例食管鱗癌患者病理組織，並與20例正常食管黏膜上皮組織相比較，發現了MUC1在食管鱗癌中表達上調，並且發現其表達與患者淋巴結轉移，術後復發及不良預後呈正相關。我們進一步檢測了食管鱗癌細胞系KYSE150，ECA109及TE-1中MUC1mRNA的表達，發現與正常食管上皮細胞系HET-1相比，各食管癌細胞系中MUC1的表達水平均有不同程度的上調。為了進一步研究MUC1在食管鱗癌發生髮展過程中的作用，我們構建了MUC1過表達及MUC1siRNA慢病毒載體，成功構建了穩定的MUC1過表達及MUC1抑制Eca109細胞系。體外實驗證實MUC1明顯促進了Eca109細胞的增殖，遷移及侵襲能力。同時，我們通過western-blot方法檢測了E-cadherin，N-cadherin及vimentin等EMT標誌物在MUC1過表達及空白對照Eca109細胞系中的表達水平，結果顯示MUC1過表達細胞株中E-cadherin的水平較對照組明顯減低，而N-cadherin及vimentin的表達水平明顯增高，這證實了MUC1在食管鱗癌EMT的過程中發揮著重要作用；但在MUC1抑制Eca109細胞系中並未發現下調MUC1能夠逆轉EMT過程，EMT的幾個分子指標並無顯著變化。為了進一步明確MUC1在食管鱗癌細胞中發揮作用的機制，我們利用基因晶片技術對MUC1過表達及MUC1抑制Eca109細胞系進行全基因檢測，與空白對照組Eca109細胞系相比較，我們發現MUC1過表達組中TGF-β通路及MAPK通路有顯著變化。
