MS培養基的配製包括以下步驟。培養基母液的配製和保存 MS培養基含有近30種營養成分，為了避免每次配製培養基都要對這幾十種成分進行稱量，可將培養基中的各種成分，按原量的20倍或200倍分別稱量，配成濃縮液，這種濃縮液叫做培養基母液。
基本介紹
- 中文名：MS培養基配方
- 作用：植物組織培養
- 配製步驟：取其總量的1/20加水稀釋
- 注意事項：操作者千萬不能離開
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基本作用
植物組織培養中常用的一種培養基是MS培養基。
配製步驟
這樣每次使用時，取其總量的1/20（50 mL）或1/200（5 mL），加水稀釋，製成培養液。現將製備培養基母液所需的各類物質的量列出，供配製時使用。
大量元素（母液Ⅰ） mg/L
NH4NO333 000
KNO338 000
CaCl2·2H2O8 800
MgSO4·7H2O 7 400
KH2PO4 3 400
微量元素（母液Ⅱ）
KI 166
H3BO3 1 240
MnSO4·4H2O 4 460
ZnSO4·7H2O 1 720
Na2MoO4·2H2O 50
CuSO4·5H2O 5
CoCl2·6H2O 5
鐵鹽（母液Ⅲ）
FeSO4·7H2O5 560
Na2-EDTA·2H2O 7 460
有機成分（母液Ⅳ）ⅣA
肌醇20 000
ⅣB煙酸100
鹽酸吡哆醇（維生素B6） 100
鹽酸硫胺素（維生素B1） 20
甘氨酸 400
以上各種營養成分的用量，除了母液Ⅰ為20倍濃縮液外，其餘的均為200倍濃縮液。
上述幾種母液都要單獨配成1 L的貯備液。其中，
母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配製方法是：每種母液中的幾種成分稱量完畢後，分別用少量的蒸餾水徹底溶解，然後再將它們混溶，最後定容到1 L。
母液Ⅲ的配製方法是：將稱好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分別放到450 mL蒸餾水中，邊加熱邊不斷攪拌使它們溶解，然後將兩種溶液混合，並將pH調至5.5，最後定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。各種母液配完後，分別用玻璃瓶貯存，並且貼上標籤，註明母液號、配製倍數、日期等，保存在冰櫃的冷藏室中。
MS培養基中還需要加入：2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）、萘乙酸(NAA）、6-苄基嘌呤（6-BA）等植物生長調節物質，並且分別配成母液（0?1 mg/mL）。其配製方法是：分別稱取這3種物質各10 mg，將2，4-D和NAA用少量（1 mL）無水乙醇預溶，將6-BA用少量（1 mL）的物質的量濃度為0.1 mol/L的NaOH溶液溶解，溶解過程需要水浴加熱，最後分別定容至100 mL，即得質量濃度為0.1 mg/mL的母液。
配製培養液 用量筒或移液管從各種母液中分別取出所需的用量：母液Ⅰ為50 mL，母液Ⅱ、Ⅲ、ⅣA和ⅣB各5 mL。再取2，4-D 5 mL、NAA 1 mL，與各種母液一起放入燒杯中。
注意事項
配製培養液時應注意：
①在使用提前配製的母液時，應在量取各種母液之前，輕輕搖動盛放母液的瓶子，如果發現瓶中有沉澱、懸浮物或被微生物污染，應立即淘汰這種母液，重新進行配製；為防止母液被微生物污染，有機母液放在冰櫃里4℃保存；
②用量筒或移液管量取培養基母液之前，必須用所量取的母液將量筒或移液管潤洗2次；
③量取母液時，最好將各種母液按將要量取的順序寫在紙上，量取1種，劃掉1種，以免出錯。溶化瓊脂 用粗天平分別稱取瓊脂9 g、蔗糖30 g，放入1 000 mL的搪瓷量杯中，再加入蒸餾水750 mL，用電爐加熱，邊加熱邊用玻璃棒攪拌，直到液體呈半透明狀。然後再將配好的混合培養液加入到煮沸的瓊脂中，最後加蒸餾水定容至1 000 mL，攪拌均勻。
需要注意的是，在加熱瓊脂，製備培養基的過程中，操作者千萬不能離開，否則沸騰的瓊脂外溢，就需要重新稱量、製備。此外，如果沒有搪瓷量杯，可用大燒杯代替。但要注意大燒杯底的外表面不能沾水，否則加熱時燒杯容易炸裂，使溶液外溢，造成燙傷。調pH 用滴管吸取物質的量濃度為1 mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培養基中，邊滴邊攪拌，並隨時用pH試紙測培養基的pH，一直調到培養基的pH為6（5.8~6.5）左右為止。培養基的分裝 溶化的培養基應該趁熱分裝。分裝時，先將培養基倒入燒杯中，然後將燒杯中的培養基倒入錐形瓶（50 mL或100 mL）中。注意不要讓培養基沾到瓶口和瓶壁上。錐形瓶中培養基的量約為錐形瓶容量的1/5～1/4。每1 000 mL培養基，可分裝25～30瓶。培養基分裝完畢後，應及時封蓋瓶口。用2塊硫酸紙（每塊大小約為9 cm×9 cm）中間夾1層薄牛皮紙封蓋瓶口，並用線繩綑紮。最後在錐形瓶外壁貼上標籤。
滅菌步驟
高壓滅菌 培養基的高壓滅菌包括以下幾個步驟。
第二，放置其他需要滅菌的物品。將其他需要滅菌的物品也放入高壓蒸氣滅菌鍋內，如裝有蒸餾水的錐形瓶、帶螺口蓋的玻璃瓶、燒杯、廣口瓶（以上物品都要用牛皮紙封口），用報紙包裹的培養皿、剪刀、解剖刀、鑷子、濾紙、鉛筆等。
第三，滅菌。待需要滅菌的物品碼放完畢，蓋上鍋蓋。在98 kPa、121 ℃下，滅菌20 min。滅菌後取出錐形瓶，讓其中的培養基自然冷卻凝固後再使
