《MFHAS1及其泛素化對膿毒症小鼠TLR2信號通路的作用機制研究》是依託復旦大學，由鐘靜擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MFHAS1及其泛素化對膿毒症小鼠TLR2信號通路的作用機制研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：鐘靜
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
膿毒症長期以來是危重患者主要致死原因，目前仍沒有成功的針對膿毒症的分子靶向治療方案。課題組發現膿毒症患者血漿MFHAS1濃度較對照組顯著升高；且MFHAS1對TLR2有特異性的雙相調節作用：先抑制後刺激；通過質譜分析，我們還找到了可能與MFHAS1結合的E3泛素連線酶praja2。本項目擬開展：①建立膿毒症小鼠模型，觀察MFHAS1和TLR2在膿毒症中的變化規律及其相互關係；②建立MFHAS1敲除膿毒症小鼠模型，明確MFHAS1對膿毒症發生髮展及TLR2的影響；③建立MFHAS1泛素化炎症細胞模型，套用免疫共沉澱、蛋白共定位、泛素化實驗等手段，確定MFHAS1能否被praja2泛素化從而影響其調控TLR2的功能。項目實施將確定MFHAS1對膿毒症的發生髮展及體內TLR2的信號傳導產生的影響，及其泛素化對TLR2信號通路調控的影響，明確MFHAS1能否作為膿毒症治療的新靶點。
結題摘要
項目背景：膿毒症長期以來是危重患者主要致死原因，而膿毒症相關性腦病（SAE）是膿毒症的常見併發症，目前仍沒有成功針對膿毒症和SAE的分子靶向治療方案。 主要研究內容與重要結果：本項目通過前期建立的膿毒症小鼠模型和MFHAS1（惡性纖維性組織細胞瘤擴增序列1）泛素化炎症細胞模型，利用免疫共沉澱、免疫螢光共定位、泛素化實驗、fear conditioning、Barnes maze、siRNA腦室內注射和神經棘突高爾基染色等實驗手段，首次發現：1、Pam3CSK4（TLR2配體）可誘導小鼠RAW264.7細胞和THP-1人單核細胞產生MFHAS1，且呈時間依賴性；MFHAS1對TLR2信號通路和炎症有雙重作用；TLR2刺激後MFHAS1誘導JNK和p38磷酸化；2、E3泛素連線酶praja2可以直接與MFHAS1結合；3、praja2促進MFHAS1泛素化積累，但並不降解MFHAS1；4、praja2泛素化MFHAS1，對TLR2介導的JNK/p38通路有正向調節作用，促進巨噬細胞向M1極化、M2向M1轉化和炎症反應；總結praja2泛素化MFHAS1對M1/M2巨噬細胞極化和炎症的影響：MFHAS1的泛素化對TLR2、JNK和p38通路下游的信號通路起正向調節作用，導致巨噬細胞從M2向M1轉化，從而促進炎症反應；5、側腦室注射MFHAS1-siRNA降低MFHAS1腦內表達，可改善膿毒症大鼠認知功能障礙，降低大鼠腦海馬區TNF-α、IL-1β和Aβ表達，減少錐體神經元樹突上棘突密度的下降，增加膿毒症大鼠腦部CA1區基底部樹突分支。科學意義：本項目結果提示MFHAS1的泛素化修飾可調節巨噬細胞M1/M2轉化和極化，具有促炎和抑瘤作用。本項目揭示了praja2作為一種新的炎症相關蛋白，其與MFHAS1的共同表達能預測炎症反應，並且TLR2/JNK/P38/NF-κB與MFHAS1一起構成泛素－蛋白酶體系統（UPS）驅動的信號通路。本研究結果將有助於設計更為有效的靶向治療策略，以治療膿毒症患者的過度炎症反應。此外，本項目揭示腦內MFHAS1 knock-down可減輕SAE大鼠認知功能障礙、神經炎症和神經元棘突的減少，這些結果將有助於設計更為有效的靶向治療策略來治療SAE患者的認知功能障礙。
