《MFHAS1在膿毒症及TLR4信號轉導通路中作用機制的研究》是依託復旦大學，由繆長虹擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MFHAS1在膿毒症及TLR4信號轉導通路中作用機制的研究
- 依託單位：復旦大學
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：繆長虹
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
抑制惡性纖維性組織細胞瘤擴增順序1(MFHAS1)可明顯增加炎性因子釋放，但是否與膿毒症炎性反應相關尚不清楚。本研究小組通過微陣列技術（Microarray）篩選，發現在TLR4敲除小鼠腹腔巨噬細胞中MFHAS1發生明顯下調，激發了對其功能位點、調控機制及與之相關的關鍵分子蛋白的探討。本課題在該基礎上通過構建MFHAS1全序列誘餌蛋白，採用酵母雙雜交及雙螢光素酶報告基因檢測等方法，篩選、驗證與MFHAS1相作用的TLR4信號通路上相關蛋白及作用方式，並根據作用方式不同鑑定起作用的蛋白位點和調控酶；通過RNA干擾等方法沉默MFHAS1功能，確定調控TLR4、MYD88、TRAF6、TAK1等信號通路上具體途徑及激活 NF-κB的作用部位；通過人體和小鼠體內實驗探討與膿毒症發生髮展、預後的相關性及對固有免疫的調控作用。為豐富和剖析膿毒症複雜的演變機制及由此帶來的新治療策略和標靶治療提供理論依據
結題摘要
膿毒血症是一種導致免疫系統功能紊亂的危重病，嚴重可導致患者的死亡。最近有文獻報導了惡性纖維組織瘤擴增序列1（MFHAS1）可以抑制TLR4信號通路，從而抑制炎症因子的釋放。但是目前的具體機制還不明確。因此我們採用了一些分子生物學的方法以研究MFHAS1在TLR4信號通路中的作用。首先我們構建了能夠穩定表達蛋白的pCDH-MFHAS1-HA質粒和細胞。然後在實驗中發現炎症或激活TLR4信號通路可以上調MFHAS1的表達。而在細胞中分別上調和下調MFHAS1後，可以抑制或促進炎症因子的表達。在免疫共沉澱、蛋白質譜分析和免疫螢光實驗中，發現MFHAS1可以和PP2A蛋白的B亞基和C亞基結合。MFHAS1可以增加PP2A的活性，但是不能通過對JNK或者p38的去磷酸化抑制炎症因子的釋放。其作用是通過對C亞基易位作用，加強了c-jun蛋白在Thr239位點的去磷酸化，使c-jun蛋白降解，從而減少轉錄因子AP-1的活性。
