《LASS2和ATP6L對阿黴素心肌毒性作用機制的研究》是依託武漢大學，由夏泠擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：LASS2和ATP6L對阿黴素心肌毒性作用機制的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：夏泠
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
阿黴素是常用的抗腫瘤藥物之一，但其副作用心肌毒性嚴重影響臨床套用。V-ATPase廣泛存在於真核細胞的細胞器膜上，調控細胞器的PH，而ATP6L則是V-ATPase V0亞基的重要組分；編碼哺乳動物神經醯胺合成酶的基因有6個（LASS1-6），其中 LASS2的含量最高，並在心臟組織中有中等程度的表達。但有關LASS2和ATP6L在阿黴素心肌毒性中的作用至今尚無報導。本研究擬在H9C2心肌細胞中觀察LASS2和ATP6L表達的改變對線粒體ROS的產生、溶酶體泌氫功能、阿黴素細胞內分布以及心肌毒性的影響；同時觀察LASS2和ATP6L兩者間的關係。本研究力圖證明，在阿黴素心肌毒性的致病機制中，可能存在著LASS2-ATP6L軸，用以調節阿黴素在細胞內的分布，進而影響阿黴素心肌毒性。因而，本研究不僅能為阿黴素心肌毒性致病機制提出新的思路，也為干預阿黴素心肌毒性提供新的潛在靶點。
結題摘要
阿黴素是常用的抗腫瘤藥物之一，但其副作用心肌毒性嚴重影響臨床套用。V-ATPase 廣泛存在於真核細胞的細胞器膜上，調控細胞器的PH，而ATP6L 則是V-ATPase V0 亞基的重要組分；編碼哺乳動物神經醯胺合成酶的基因有6 個（LASS1-6），其中 LASS2 的含量最高，並在心臟組織中有中等程度的表達。但有關LASS2 和ATP6L 在阿黴素心肌毒性中的作用至今尚無報導。本項目旨在明確LASS2-ATP6L軸在阿黴素心肌毒性中的作用機制，以期為干預阿黴素心肌毒性提供潛在治療靶點。研究內容主要集中在以下三個方面：（1）觀察阿黴素作用下H9c2心肌細胞的凋亡，對ATP6L和LASS2基因與蛋白表達的影響，以及抑制溶酶體泌氫功能能否影響阿黴素心肌毒性和改變阿黴素細胞內分布；（2）驗證ATP6L能否通過影響阿黴素在H9c2心肌細胞溶酶體內的分布來參與阿黴素心肌毒性；（3）驗證LASS2是否通過ATP6L對阿黴素在H9c2心肌細胞溶酶體內分布的影響，繼而參與阿黴素心肌毒性。我們的研究顯示：（1）阿黴素能誘導H9c2細胞的凋亡，並伴隨著凋亡相關基因表達的升高；（2）阿黴素作用下ATP6L基因和蛋白表達呈一致性升高，LASS2基因表達增加而蛋白表達則降低，呈相反趨勢；（3）V-ATPase抑制劑亦能產生相同效果，且聯合阿黴素時能發揮協同作用；（4）抑制V-ATPase泌氫功能能減少阿黴素在溶酶體內的分布；（5）ATP6L表達的改變能影響溶酶體泌H+功能和心肌細胞的凋亡；（6）改變ATP6L的表達能影響阿黴素在溶酶體內的分布；（7）ATP6L和LASS2基因表達呈負相關；（8）阿黴素能促進ATP6L和LASS2基因的過表達卻抑制ATP6L和LASS2蛋白的過表達。本研究的核心意義在於首次證實囊泡V-ATPase泌氫功能與阿黴素心肌毒性有關，且其V0亞基的重要組分ATP6L在其中發揮著舉足輕重的作用。本研究成果不僅為闡明阿黴素心肌毒性的致病機制提供了新的思路，也為干預阿黴素心肌毒性提供了新的潛在靶點。此外，我們的研究還顯示，LASS2與ATP6L基因表達呈負相關，且阿黴素作用下LASS2基因與其蛋白表達呈不一致性，這不僅提示在阿黴素心肌毒性的致病機制中LASS2-ATP6L軸存在的可能性，也為今後研究ATP6L和LASS2間確切作用機理提供了新的研究方向。
