《Klf4/MSI2信號通路在胰腺癌神經浸潤中的作用及機制研究》是依託西安交通大學，由郭坤擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Klf4/MSI2信號通路在胰腺癌神經浸潤中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：郭坤
- 依託單位：西安交通大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
神經浸潤（PNI）是胰腺癌術後復發、預後差的重要原因，但其機制尚未闡明。研究表明MSI2在腫瘤進展及神經發育中發揮作用，Klf4在胰腺癌中表達缺失，且其與神經軸突的再生相關。課題組前期研究發現MSI2在胰腺癌中高表達，且與PNI密切相關，胰腺癌中MSI2與Klf4表達呈負相關，MSI2基因啟動子區域存在Klf4結合位點。我們推測Klf4與MSI2共同參與胰腺癌PNI，Klf4參與了MSI2基因的轉錄調控，Klf4/MSI2信號通路及下游基因對胰腺癌PNI發揮重要調控作用。為證實這一假說，我們將構建腫瘤細胞體內外PNI模型，採用分子生物學、流式細胞儀、雷射共聚焦、qRT-PCR、Western blot等方法從組織學、細胞學、分子生物學等水平，通過雙向調節MSI2蛋白，探究Klf4/MSI2信號通路在胰腺癌PNI中的作用。本課題將從新的視覺闡明胰腺癌PNI的發病機制，為胰腺癌防治提供新依據。
結題摘要
背景：胰腺癌是惡性度極高的消化系統腫瘤，預後極差。神經浸潤是引起胰腺癌術後高復發率的重要原因。但是，目前對神經浸潤的發病機制尚未闡明，尋找可能影響胰腺癌神經浸潤的致病基因有助於進一步明確其發病機制，探討信號通路在神經浸潤發生髮展中的作用，可以為胰腺癌的防治提供新的思路。 研究內容：通過對胰腺癌組織中Klf4、MSI2表達檢測，進行臨床數據分析及相關性分析，通過Klf4、MSI2在胰腺癌細胞中的表達檢測、細胞轉染和穩定轉染株的篩選，進行分子生物學檢測和免疫形態學檢測；通過胰腺癌體外神經浸潤模型，在體外研究MSI2對胰腺癌神經浸潤的作用機制；通過Klf4對MSI2基因啟動子的調控檢測，對其下游信號分子進行研究；通過裸鼠相關模型，對Klf4/MSI2信號通路在胰腺癌神經浸潤中的作用進行驗證。 結果：MSI2在胰腺癌組織中表達明顯高於正常胰腺組織，MSI2的表達和胰腺癌病例資料的腫瘤細胞分級、TNM分期及淋巴結轉移密切相關。上調MSI2表達能夠促進胰腺癌細胞的增殖能力及克隆形成能力，下調MSI2表達能夠抑制胰腺癌細胞的增殖能力及克隆形成能力。MSI2能夠明顯促進胰腺癌細胞的遷移侵襲能力，上調MSI2表達能夠顯著增強MDA Panc-28肝轉移能力，而下調MSI2能夠抑制AsPC-1細胞的肝轉移能力。在胰腺癌組織晶片中研究發現，胰腺癌組織中KLF4和MSI2的表達呈負相關。在MSI2啟動子區域存在11個潛在的KLF4結合位點，完成了全長MSI2啟動子序列以及其缺失突變序列的克隆生成，研究了KLF4在轉錄水平調節MSI2的表達，利用啟動子報告和雙螢光素酶檢測KLF4對MSI2的表達，發現KLF4抑制了MSI2的活性。通過腫瘤細胞與新生大鼠背根神經節共培養、裸鼠坐骨神經神經浸潤模型及胰腺癌荷瘤裸鼠模型，在體內外驗證MSI2對胰腺癌神經浸潤的作用機制。 意義：MSI2基因在胰腺癌神經浸潤過程中發揮重要調節作用，Klf4參與了MSI2信號傳導的調控，這種調控作用是通過直接影響MSI2基因啟動子活性來實現的；Klf4/MSI2信號通路通過下游分子調控胰腺癌神經浸潤的發生，本研究為胰腺癌神經浸潤防治提供新的依據。
