《KLF4對宮頸癌細胞放療敏感性的調節作用及分子機制》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由宋暉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：KLF4對宮頸癌細胞放療敏感性的調節作用及分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：宋暉
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
由於放療抵抗的存在，宮頸癌的治療效果仍然受限，放療敏感性的調節機制仍未完全闡明。我們的前期研究工作證實：轉錄因子KLF4在宮頸癌的發生髮展過程中發揮抑癌基因作用，對抑癌基因NDRG2具有轉錄激活作用，不僅與宮頸癌細胞放療敏感性相關而且還參與了細胞受照射後DNA損傷誘發的應激反應。結合文獻我們推測：KLF4可能作為NDRG2上游調控元件參與DNA損傷誘發的應激反應調節宮頸癌細胞放療敏感性。本課題擬在前期研究基礎上，利用DNA重組技術構建KLF4的正義表達載體及針對KLF4的siRNA表達載體，藉助細胞轉染、RNAi技術改變KLF4表達狀況，通過體內外實驗明確KLF4對宮頸癌細胞放療敏感性的調節作用；採用基因晶片、染色質免疫共沉澱檢測KLF4表達調變後差異基因表達，生物信息學技術驗證分析KLF4相互作用分子，對進一步探討宮頸癌放療增敏新途徑，尋找新的分子靶標具有重要的理論與實際意義。
結題摘要
由於放療抵抗的存在，宮頸癌的治療效果仍然受限，放療敏感性的調節機制仍未完全闡明。我們的前期研究工作證實：轉錄因子KLF4( Krüppel-like factor 4)在宮頸癌的發生髮展過程中發揮抑癌基因作用，結合文獻我們推測：KLF4可能參與DNA損傷誘發的應激反應調節宮頸癌細胞放療敏感性。本課題從組織、細胞、動物以及分子機制4個方面探討了宮頸癌放療增敏新途徑。①回顧性病例研究顯示：KLF4表達與放療敏感性相關，在放療耐受組中表達高于敏感組，KLF4的高表達可能與放療後原位復發相關而與遠處轉移無關；KLF4高表達組總生存期和無瘤生存期顯著低於低表達組；多因素COX回歸分析提示：KLF4高表達和組織類型可能是影響預後的高風險因素。②選擇KLF4高表達的HeLa和低表達的C33A作為後續實驗細胞株，通過平板克隆，細胞流式術檢測周期和凋亡鑑別HeLa和C33A細胞放療敏感性，使用慢病毒製備KLF4不同表達狀況的宮頸癌細胞株，結果顯示：在宮頸癌細胞中，KLF4與放療敏感性相關，KLF4表達增高降低宮頸癌細胞放療敏感性。③通過在體模型確認KLF4對宮頸癌裸鼠移植瘤生長及放療敏感性的調節作用，證實KLF4高表達降低裸鼠移植瘤放療敏感性。④運用表達譜基因晶片檢測，篩選差異基因，KLF4上調15個基因，而與放療相關的基因只有胰島素樣生長因子2（insulin-like growth factor2, IGF2），我們進一步研究發現KLF4可能通過上調IGF2激活AKT途徑降低宮頸癌放療敏感性。上述實驗結果對進一步探討宮頸癌放療增敏調節機制，尋找新的分子靶標具有重要的理論與實際意義。
