《IVF小鼠肺臟INSIG-SCAP-SREBP表達改變及表觀遺傳機制研究》是依託浙江大學，由樂芳擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：IVF小鼠肺臟INSIG-SCAP-SREBP表達改變及表觀遺傳機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：樂芳
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
流行病學資料已經證明IVF可導致出生低體重兒和新生兒呼吸系統功能和/或解剖異常，本課題組前期小鼠模型研究提示IVF不僅影響子代出生體重和成年後的血脂代謝，而且導致老年小鼠肺表面活性物質減少和慢性炎症病變發生。同時，我們新近發現肺表面活性物質合成代謝的重要參與者：胰島素誘導基因-類固醇調節元件結合蛋白-及其裂解激活蛋白（INSIG-SCAP-SREBP）的表達在IVF老年小鼠肺臟中存在顯著改變，使我們有理由認為IVF影響小鼠老年期呼吸系統健康。故擬在已有實驗基礎上，進行老年小鼠肺臟INSIG-SCAP-SREBP通路調節區甲基化修飾研究，並逆向分析著床前胚胎、新生和性成熟小鼠肺臟該通路表達與修飾動態變化，探索IVF導致肺部炎性疾病發生的時間窗與表觀遺傳機制。最後通過對差異基因低表達研究，驗證IVF與肺部疾病的關係，為IVF可能的改進途徑和IVF子代慢性肺部炎性疾病風險評估提供研究基礎。
結題摘要
輔助生殖技術（assisted reproductive technology, ART）相關的胚胎體外暴露及不良出生結局可增加成年後肺部慢性疾病的發生率。另有研究提示脂代謝異常與肺部慢性疾病的發生密切相關，而胰島素誘導基因（insulin-induced gene, INSIG）、類固醇調節元件結合蛋（sterol regulatory element-binding protein, SREBP）及其裂解激活蛋白（SREBP cleavage-activating protein, SCAP）是肺表面活性物質合成代謝的重要參與者。本項目通過建立ART 小鼠模型，包括：新生、性成熟和老年的體外受精（in vitro fertilization, IVF），單精子卵細胞漿內注射（intracytoplasmic injection, ICSI），並以體內受精小鼠為對照組。套用HE染色、ELISA、定量PCR、Western-blot、亞硫酸氫鹽PCR及焦磷酸測序等技術， 進行ART小鼠的血清、肺臟組織病理及肺臟上INSIG-SCAP-SREBP基因表達和修飾變化研究。研究結果發現：在新生及性成熟小鼠中，ART與對照組比較並未發現肺部炎症病理上改變，但在老年時期有4隻ART小鼠出現慢性肺炎的發生。同時，ART組老年小鼠肺臟組織灌洗液中PC、DSPC和蛋白存在顯著下降，並且ICSI老年小鼠血清炎症相關指標CRP，IgM和IgG呈現顯著性升高。在新生小鼠中，相較於體內組，ART組肺臟上Insig/Scap/Srebf mRNA呈現顯著性低表達。同時，ART組肺臟的SREBP1和INSIG1 的蛋白也顯著性低表達及其甲基化率顯著性升高。在性成熟時期，ART組肺臟上只有Insig1 mRNA and nSREBP1 蛋白呈現顯著性低表達相較於體內組。但到老年時期，ART組肺臟的INSIG1, SCAP和SREBPs不僅表達出現顯著性降低，它們的甲基化率也出現顯著性改變。研究表明ART技術會增加成年後肺部炎性疾的發生率，並與肺臟的INSIG-SCAP-SREBP通路密切相關。因此，我們需要對ART出生子代呼吸系統進行長遠的健康評估。
