IRF-1在移植肝缺血再灌注損傷中的作用及機理研究

《IRF-1在移植肝缺血再灌注損傷中的作用及機理研究》是依託南開大學，由朱志軍擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：IRF-1在移植肝缺血再灌注損傷中的作用及機理研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：朱志軍
• 依託單位：南開大學

中文摘要

肝臟缺血再灌注損傷（HIRI）是導致肝移植術後早期肝功異常或衰竭的主要原.因之一，在肝移植中HIRI可分為熱HIRI和冷保存HIRI，其產生機制尚不十分清楚，目前仍無有效的預防和控制辦法。干擾素調節因子-1（IRF-1）是一種核轉錄因子，我們前期工作發現IRF-1在HIRI後表達升高，參與HIRI過程，但其肝移植HIRI中的作用尚未可知。因此我們假設，IRF-1是肝移植中HIRI後炎症反應的重要調節因子，研究IRF-1在肝移植HIRI中的作用機制，明確通過阻斷IRF-1是否可以改善肝移植HIRI。本課題套用小鼠原位肝移植模型、小鼠HIRI模型，體外細胞培養，腺病毒轉染IRF-1技術，基因敲除技術及一些常規檢測方法，從細胞及分子水平檢測IRF-1對肝移植HIRI 的作用及其作用機制，進一步評估IRF-1在肝移植HIRI的臨床套用價值。

結題摘要

本研究在肝細胞系、普通小鼠、基因敲出小鼠中，證實了IRF-1對肝臟熱缺血再灌注損傷（IRI）的促進作用。提出並系統的證實了：IRF-1通過P38信號通路促進自噬，最終加劇肝臟熱缺血再灌注損傷（IRI）。主要研究結果：1、IRF-1的表達與IR後小鼠肝臟的損傷和凋亡情況一致。小鼠熱缺血再灌注（IR）12h時肝竇區損傷及壞死區域最嚴重，而再灌注24時肝組織病變較再灌注12h減輕，再灌注後6h、12h時IRF-1升高最明顯。小鼠肝臟IR後，肝組織TNF-α、HMGB1，血清ALT、AST、TNF-α、HMGB1水平與IRF-1的表達一致。2、IRF-1升高可導致肝臟IRI加重。小鼠肝臟IRF-1過表達時，肝臟IR後組織損傷表現明顯加重；小鼠肝細胞IRF-1過表達時，IR後活化Caspase-3水平升高。3、P38是IRF-1促進肝臟IRI的重要信號通路。IR背景下，小鼠肝組織IRF-1和p-P38表達變化存在一致性，阻斷P38後IRF-1的損傷作用減弱。體外實驗中IRF-1過表達和受抑制時，p-P38水平出現同步變化。4、自噬是小鼠肝臟IRI的重要過程，阻斷自噬可以減弱IRI。小鼠肝臟IRI的過程中，肝細胞自噬明顯增加，與肝臟的組織損傷一致。促進自噬加劇肝組織IRI；抑制自噬減輕肝組織IRI。5、在肝臟IRI過程中，IRF-1對自噬存在促進作用，減少IRF-1表達可抑制自噬。小鼠和體外實驗發現，IRF-1過表達時肝細胞自噬水平升高。體外抑制IRF-1表達後，肝細胞自噬水平下降。6、IRF-1通過P38信號通路促進自噬。體外實驗中，P38抑制後，過表達IRF-1的肝細胞，自噬水平不再升高。7、阻斷IRF-1後，P38信號減弱、自噬水平降低，導致肝臟IRI改善。IRF-1敲除小鼠與野生型小鼠對比：IRI後肝組織學表現改善，ALT水平降低，肝內凋亡細胞減少，肝細胞自噬體減少，p-P38水平降低，小鼠肝臟IRI程度明顯減輕。綜上所述，IRF-1通過P38信號通路和自噬促進肝臟IRI。阻斷IRF-1、P38和自噬，有可能作為肝移植中肝臟IRI的干預方法。