《IGF2/ IGF1R信號通路與肝癌靶向性基因治療的關係研究》是依託東南大學，由張業偉擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：IGF2/ IGF1R信號通路與肝癌靶向性基因治療的關係研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張業偉
- 依託單位：東南大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
目前肝癌治療後的高轉移率和高復發率及癌細胞對放化療不敏感，在臨床治療中亟待解決。但肝癌的發生、發展和轉移的確切機制尚未闡明，可能與正常基因調控紊亂有關。IGF2/ IGF1R信號通路異常激活，已被認為是肝癌發生髮展的關鍵。本課題組首次發現CD90、IGF1R、hTERT的表達與肝癌發生髮展呈正相關，而與HCC患者生存率呈負相關；發現IGF1R通過對P53進行調控，進一步發揮其促進肝癌細胞增殖功能。靶基因選擇是腫瘤基因治療的一個關鍵點。AFP作為肝癌診斷指標已經成熟套用於臨床多年，卻始終沒有套用於治療方面。本課題將以IGF1R、P53及AFP作為肝癌基因治療靶目標，通過構建沉默IGF1R和表達WtP53的重組慢病毒及運用基因重組技術使其表達抗AFP單鏈抗體增加其靶向性。通過臨床肝癌患者標本、肝癌細胞系以及肝原位移植瘤動物模型探討其對肝癌細胞的生長和凋亡的影響，為肝癌基因治療拓展新的思路。
結題摘要
目前肝癌治療後的高轉移率和高復發率及癌細胞對放化療不敏感，在臨床治療中亟待解決。但肝癌的發生、發展和轉移的確切機制尚未闡明，可能與正常基因調控紊亂有關。IGF2/IGF1R信號通路異常激活，已被認為是肝癌發生髮展的關鍵。本課題組既往首先發現CD90、IGF1R、hTERT的表達與肝癌發生髮展呈正相關，而與HCC患者生存率呈負相關；發現IGF1R通過對p53進行調控，進一步發揮其促進肝癌細胞增殖功能。靶基因選擇是腫瘤基因治療的一個關鍵點。AFP作為肝癌診斷指標已經成熟套用於臨床多年，卻始終沒有套用於治療方面。 本課題擬（1）通過檢測分析肝癌組織、正常肝臟標本、肝癌細胞系中IGF2/IGF1R的表達，結合臨床資料研究其與肝癌分期、轉移的相關性；（2）通過選擇肝癌細胞株HEP3B，構建重組慢病毒載體敲除肝癌細胞IGF1R表達和增強p53表達，分析細胞增殖、凋亡及對藥物敏感性變化；（3）利用肝原位移植瘤模型，驗證通過抑制肝癌組織中的IGF2/IGF1R的表達和增強P53表達，可以達到抑制肝癌細胞生長和誘導肝癌細胞凋亡的作用。 我們發現：（1）IGF-1R蛋白是通過啟動2條信號傳遞鏈：RAS-RAF-MAPK和PI3K-PKB/AKT，促進肝癌發生髮展和復發轉移。當IGF-1R信號被激活後，S期肝癌細胞比例明顯增加，G0/G1期肝癌細胞比例明顯減少，同時發現IGF-1R對P53也具有調控功能，從而闡明了肝癌發生、發展的新機制。（2）通過大量人體肝癌標本研究，我們發現IGF-1R在不同惡性程度肝癌中的表達程度不盡相同，且IGF-1R的表達水平與肝癌臨床預後緊密相關。（3）成功構建攜帶AFP-WtP53-pPRIME-miR30-shRNA-IGF-1R融合基因的慢病毒，通過體內外實驗研究發現IGF1R、p53調控對肝癌細胞的生長有明顯抑制和促凋亡作用，從而驗證IGF-1R具有促進肝癌發生髮展功能。（4）首次從肝癌組織中篩出調控IGF-1R上游一條新的lncRNA：IRAIN，該lncRNA為IGF-1R的反義非編碼RNA，在肝癌中低表達，具有負向調控IGF-1R表達功能，並通過IRAIN-DNMT1-SLIT2三者之間相互影響，阻斷IGF-1R促進腫瘤細胞增殖信號通路。 本課題探討了IGF1R、P53及AFP作為肝癌基因治療靶目標的可行性和信號網路，為肝癌基因治療拓展新的思路。
