Hippo-YAP信號通路對小鼠耳蝸毛細胞再生的調控作用研究

《Hippo-YAP信號通路對小鼠耳蝸毛細胞再生的調控作用研究》是依託南京大學，由俞晨傑擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：Hippo-YAP信號通路對小鼠耳蝸毛細胞再生的調控作用研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：俞晨傑
• 依託單位：南京大學

項目摘要

感覺毛細胞在聽覺功能中起著重要作用，毛細胞的損傷將直接導致聽力損失。研究表明，毛細胞損傷後Lgr5陽性內耳幹細胞可以再生毛細胞，並且該過程受到Wnt信號調控。在多種器官中已有報導Hippo信號和Wnt信號存在相互作用；但是Hippo信號對毛細胞再生的調控機制還不清楚。本項目將研究Hippo信號對內耳幹細胞的調控機制，以促進其再生有功能的毛細胞，從而重建內耳結構和功能。擬實現以下目標：一、在離體實驗中研究Hippo信號對流式分選出的內耳幹細胞增殖分化的調控機制；二、在離體實驗中研究Hippo和Wnt信號對內耳幹細胞的協同調控機制；三、在活體毛細胞新黴素損傷模型中研究Hippo信號如何調控內耳幹細胞，從而促進毛細胞再生。本課題將為臨床上套用內耳幹細胞恢復聽覺功能奠定實驗基礎。

結題摘要

毛細胞的不可逆損傷是感音神經性耳聾的主要致病因素。在哺乳動物中，新生兒毛細胞損傷後其再生能力存在容量限制，成年後由於毛細胞再生能力的不足，將導致毛細胞的永久性損傷。研究表明，新生小鼠耳蝸中的Lgr5陽性支持細胞可作為內耳毛細胞再生的祖細胞。因此，促進小鼠Lgr5陽性內耳幹細胞的毛細胞再生能力可能是聽力恢復治療的一種潛在策略。Hippo信號通路對細胞的增殖、分化、死亡、生長都具有調控作用。因此本課題旨在探究Hippo-YAP信號通路對小鼠耳蝸毛細胞再生的調控作用。我們通過RT-PCR、Western blot及免疫螢光驗證Hippo-YAP信號通路在小鼠耳蝸中的表達情況。利用新生小鼠Lgr5陽性內耳幹細胞的成球實驗、分化實驗，耳蝸組織體外培養實驗進行了系統性研究。結果顯示：Hippo-YAP信號通路在小鼠耳蝸中高度表達。激活 YAP可以促進新生小鼠Lgr5陽性內耳幹細胞的增殖及分化，進而提高了毛細胞再生能力。相反地，抑制YAP使小鼠Lgr5陽性內耳幹細胞的增殖、分化能力、及毛細胞再生均被削弱。這可能與YAP激活後促進了細胞 G1-S期的轉換，激活了YAP下游增殖相關靶基因(ctgf, cyr61)的表達，提高了Wnt/β-catenin的轉錄活性有關。本課題研究可能對探索調節哺乳動物內耳毛細胞再生機制有一定幫助，有望為未來臨床上聽力恢復治療提供新的策略。