HPV 早期編碼區E6、E7基因是病毒癌基因。E6/E7 mRNA是癌基因E6和E7的轉錄產物，其表達水平體現了癌基因的活性。HPV mRNA的檢測方法包括 Real-Time PCR、依賴核酸序列的擴增技術( nucleic acid sequence-based amplification,NASBA) 和支鏈DNA 技術( branch DNA,bDNA) 等。2006年歐洲生殖器感染和腫瘤研究組織( European Research Organizationon Genital Infection and Neoplasia， EUROGIN) 取得了共識，認為 HPV E6/E7 mRNA 檢測應作為宮頸癌篩查的重點研究內容。
基本介紹
- 中文名：人乳頭瘤病毒E6E7核糖核酸檢測
- 外文名：human papillomavirus E6E7 mRNA detection
- 相關疾病：宮頸癌前病變
- 檢測方法：Real-Time PCR、依賴核酸序列的擴增技術和支鏈DNA技術等
檢測背景,檢測意義,檢測原理及套用,
檢測背景
HPV E6/E7 mRNA與宮頸癌
E6/E7 mRNA是HPV致癌基因(遺傳物質)表達(開始合成致癌蛋白)的直接標誌物、是致癌蛋白合成的模版、是宮頸病變開始和進展的必由之路。
檢測意義
作為新一代宮頸病變評估新技術——E6/E7 mRNA檢測，與HPV DNA檢測相比，具有更好的特異性和陽性預測值，有效地避免HPV的一過性感染導致的過度診斷和治療，得到越來越多醫學專家的重視和推廣。因此，在做高危HPV檢測時，專家建議最好做一下癌基因E6/E7 mRNA檢測，從而評估宮頸癌變的發展趨勢。戴建榮教授指出，E6/E7 mRNA是第2代HPV檢測生物標誌物，HPV DNA說明HPV感染，E6/E7 mRNA 是HPV致癌基因活躍狀態的指標。
在全球範圍內,約70%的宮頸癌由高危型HPV16型、18型引起。在我國2007年完成的流行病學調查顯示,99.7%的宮頸癌與高危型人乳頭瘤病毒(HPV)感染有關,高危型HPV持續性感染是宮頸癌的主要病因。從HPV感染到發生癌前病變,進而發展到宮頸癌,一般需要5-12年的時間。在這個過程中可以通過進行宮頸癌篩查,及早發現宮頸癌前病變,給予適當的治療後即可終止其發展為宮頸癌。如果忽視宮頸癌篩查,則會錯過最佳的治療時機。
檢測原理及套用
E6/E7是病毒的原癌基因，其蛋白的表達是細胞癌變的必要因素，E6/E7 mRNA是宮頸癌篩查的有效標誌物。目前，主要的檢測方法是通過反轉錄PCR擴增或者依賴支鏈DNA信號擴增檢測E6/E7 mRNA。國內已經上市的國產試劑包括人乳頭瘤病毒E6/E7 mRNA檢測試劑盒（支鏈DNA擴增法）。支鏈DNA （bDNA）技術是一種新型的核酸雜交方法，與常規實時PCR技術相比，bDNA技術無需抽提純化DNA/RNA,無需反轉錄和PCR 擴增,只要將樣本用特定裂解液裂解後,經探針雜交與信號放大即可得到檢測結果。
HPV E6/E7 mRNA檢測在臨床診治宮頸疾病方面起到了關鍵性的作用,主要在以下三個方面
一、評估宮頸病變進展風險以及分流HPV感染高危人群
HPV 檢測大多數針對病毒 DNA,HPV DNA檢測用於宮頸癌篩查的敏感度和特異度都高於細胞學檢查。但大部分患者 HPV 感染後可通過自身免疫功能進行清除,且HPV感染到發生癌前病變和癌變是一個漫長的過程,只有少部分HPV 感染才會引起宮頸病變,因此,HPV DNA檢測對宮頸病變的風險預測過早。而癌基因E6和E7的表達是導致宮頸細胞惡性轉化並發展至宮頸癌的必要步驟,相對於HPV DNA檢測,E6/E7 mRNA檢測能夠更精確地預測細胞向高度病變和癌症轉變的可能性。
二、在宮頸癌篩查中的套用
HPV E6/E7 mRNA 排除可疑或低度病變的能力更強,能夠將更多無進展的病變重新歸入常規的篩查管理中,可有效減少對疾病嚴重程度的誤判,減輕過度診斷和治療給患者帶來的經濟和心理壓力。此外,對細胞學異常或HR-HPV陽性患者的隨訪發現,HPV E6/E7 mRNA檢測比重複細胞學檢測更有價值。有研究證明TCT 聯合 HPV E6/E7 mRNA 檢測 CIN 及宮頸癌的陽性率高於單獨 TCT 或 HPV E6/E7 mRNA 的檢測。提示 TCT 聯合 HPV E6/E7 mRNA 既能掌握癌基因的活性狀態,又能了解細胞病變程度,互相彌補不足,提高了診斷效能。
三、在宮頸癌預後判斷中的套用
HPV E6/E7 mRNA 可以在 E6/E7癌基因感染的細胞中持續表達,在宮頸癌的發生、發展中起關鍵作用,是患者預後重要的評價因子,檢測HPV E6/E7 mRNA可以作為癌前病變轉歸的指標。
