《HIV-1Tat抑制EAAT-2表達參與HAD發生的分子機制》是依託廈門大學，由邢惠琴擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：HIV-1Tat抑制EAAT-2表達參與HAD發生的分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：邢惠琴
- 依託單位：廈門大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
星形膠質細胞EAAT-2表達低下是導致HIV相關性痴呆（HAD）中胞外谷氨酸濃度過高誘導神經元凋亡的關鍵因素，然而其機制尚未闡明。我們發現HIV-1Tat可上調AEG-1，下調EAAT-2表達，並且AEG-1過表達的小鼠星形膠質細胞株中p38MAPK高度磷酸化；HIV-1Tat可使小膠質細胞產生過量IL-1β進而下調EAAT-2表達。由此我們推測HIV-1Tat至少通過以下兩種機制下調EAAT-2表達，參與HAD的發生：①HIV-1Tat上調AEG-1表達，進而通過p38-MAPK等信號通路下調EAAT-2表達。②HIV-1Tat通過活化小膠質細胞釋放過量的IL-1β間接調節EAAT-2表達。本項目擬從SHIV感染恆河猴動物實驗、臨床屍檢標本分析、細胞模型三個層面，使用雷射纖維切割、ChIP等技術，闡明HIV-1Tat抑制EAAT-2表達的分子機制，確定其調控的信號分子網路。
結題摘要
星形膠質細胞谷氨酸轉運蛋白2（excitatory amino acid transporter-2，EAAT-2）表達低下是導致人類免疫缺陷病毒相關性痴呆 (human immunodeficiency virus-associated dementia，HAD)中胞外谷氨酸濃度過高誘導神經元凋亡的關鍵因素，然而其機制尚未闡明。我們使用11隻SHIV感染的恆河猴動物模型探討HIV-1Tat對EAAT-2的作用及其分子機制。我們發現，在SHIV感染的恆河猴大腦皮層中水通道蛋4（AQP4）表達減少，且AQP4表達減少與神經元和膠質細胞凋亡、及其HAD的發生有關。 我們進一步研究發現，在SHIV感染的恆河猴大腦皮層中星形膠質細胞高表達基因-1（Astrocyte-Elevated Gene-1, AEG-1）的表達增加，統計分析顯示AEG-1陽性細胞數量與EAAT-2陽性面積呈負相關，提示AEG-1過表達與EAAT-2表達低下相關。 我們進一步使用細胞模型探討EAAT-2表達低下的分子機制。我們使用HIV-1Tat 處理U87細胞後，Waster Blot 顯示EAAT-2表達減少，提示HIV-1Tat可以下調EAAT-2的表達。進一步的研究結果證實HIV-1Tat可以通過PI3-K信號通路上調AEG-1的表達，而上調的AEG-1則通過NF-kB信號通路上調陰陽-1（Yin Yang-1,YY-1）進而起到抑制EAAT-2的作用。EAAT-2表達減少，突觸間隙谷氨酸濃度過高或持續激活谷氨酸受體導致Ca2＋內流而引起神經元損傷。我們的結果將為HAD提供新的治療靶點。
