《HIF-2α調控自然殺傷T細胞參與肝缺血再灌注損傷的機制》是依託上海交通大學，由張明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：HIF-2α調控自然殺傷T細胞參與肝缺血再灌注損傷的機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：張明
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
自然殺傷T（NKT）細胞是肝缺血再灌注損傷（IRI）關鍵的效應性炎細胞。我們在預實驗中發現：與野生型NKT細胞不同，缺氧誘導因子（HIF）-2α高表達的NKT細胞不會加重肝IRI，而套用腺苷A2a受體（Adora2a）抑制劑可逆轉其免疫耐受效應。我們推測HIF-2升高后作為轉錄因子激活Adora2a表達而發揮抑炎作用。我們構想通過不同方法獲得HIF-2α敲除/高表達的小鼠/人NKT細胞，觀察HIF-2α表達變化對細胞表型、功能及Adora2a表達的影響。對NKT細胞中HIF-2與Adora2a之間可能存在的轉錄調控關係進行分析和確認。對高表達HIF-2α的NKT細胞實施Adora2a RNA干擾，進一步分析細胞表型和功能變化。通過過繼輸注實驗觀察NKT細胞HIF-2α/Adora2a表達變化對小鼠肝IRI的影響。本研究將可能揭示NKT細胞功能調控的新機制，並為肝IRI提供新的治療干預靶點。
結題摘要
自然殺傷T（NKT）細胞是缺血再灌注損傷（IRI）關鍵的效應性炎細胞。缺氧誘導因子是細胞適應缺氧環境最重要的分子調控系統之一。缺氧誘導因子（HIF）-2對NKT細胞存在怎樣的影響，這種影響在缺血再灌注損傷中又發揮怎樣的作用既往沒有研究報導。本研究採用Lck-Cre介導小鼠T/NKT細胞系HIF-2α敲除，發現HIF-2α敲除導致小鼠外周NKT細胞自發性活化（FasL表達升高），而缺血再灌注後的腎臟組織中CD4+NKT細胞大量浸潤，這些大量浸潤的NKT細胞顯著加重腎臟缺血再灌注損傷。利用單克隆抗體分別清除NKT細胞或FasL+細胞能夠明顯降低腎臟缺血再灌注損傷，並且消除HIF-2α-/-和野生型小鼠之間的腎臟缺血再灌注損傷的差異，提示HIF-2α敲除後活化的NKT細胞（FasL+）是HIF-2α敲除鼠更為嚴重的缺血再灌注損傷主要的根源。腺苷A2A受體（Adora2a）激動劑CGS21680對野生型小鼠的腎臟缺血再灌注損傷有顯著保護效果，但是對HIF-2α-/-小鼠則完全無效，提示HIF-2α敲除後NKT細胞表面腺苷A2A受體的表達受到顯著影響。野生型NKT細胞過繼輸注缺乏淋巴細胞的Rag1敲除小鼠後會加重其腎臟缺血再灌注損傷，但這種損傷會被CGS21680明顯緩解。與野生型NKT細胞形成鮮明對比，HIF-2α-/-NKT細胞過繼轉移後的Rag1敲除小鼠不僅腎IR損傷更為嚴重，而且CGS21680治療完全無效，進一步提示HIF-2α敲除通過影響NKT細胞表面腺苷A2A受體的表達對腎臟缺血再灌注損傷造成顯著影響。一系列體外細胞實驗研究發現HIF-2不僅能與Adora2a啟動子序列直接結合促進其表達，而且其敲除能夠直接導致缺氧培養條件下NKT細胞中Adora2a mRNA及蛋白含量極度減低，從而證實在NKT細胞中HIF-2對Adora2a的表達存在轉錄調控關係。本課題研究揭示了缺血再灌注損傷所繼發的炎症反應的新調控機制，且這種新機制的發現很可能會促進我們對包括腫瘤在內的其它免疫學疾病發病機制的理解。從臨床的角度，HIF-2激動劑羅沙司他作為一種新型抗貧血藥物已經進入三期臨床研究，這樣一個在尿毒症群體中有著極大套用價值的抗貧血藥物可能具有抑制缺血再灌注損傷的作用，也值得我們進一步開展臨床研究。
