《GPR109A在奶牛乳腺上皮細胞炎症反應中的作用及其分子機制》是依託吉林大學，由付守鵬擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：GPR109A在奶牛乳腺上皮細胞炎症反應中的作用及其分子機制
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：付守鵬
- 依託單位：吉林大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
乳房炎給奶牛養殖業造成巨大的經濟損失。目前抗生素仍然是其預防和治療的主要手段，但是隨之帶來的細菌耐藥性及食品抗生素殘留等問題日趨嚴重。因此，迫切需要尋找安全、有效的防治乳房炎的方法。GPR109A是Gi蛋白偶聯的受體。本課題組前期發現在奶牛和小鼠乳腺上皮細胞中均有GPR109A表達，並且其可能具有調節LPS誘導的乳腺上皮細胞炎症反應的功能。但是GPR109A能否抑制LPS誘導的乳腺上皮細胞炎症反應，迄今國內外尚無報導。因此，本項目擬套用體外乳腺上皮細胞炎症模型及在體GPR109A敲除小鼠乳房炎模型，利用Western blotting、螢光定量PCR、免疫螢光、ELISA、EMSA等技術，從分子、細胞和整體水平探討GPR109A對LPS誘導的乳腺上皮細胞炎症反應的影響及其分子機制，揭示GPR109A在乳房炎發生髮展中的作用，以期為乳房炎的防治提供新的靶點。
結題摘要
乳房炎給奶牛養殖業造成巨大的經濟損失。目前抗生素仍然是其預防和治療的主要手段，但是隨之帶來的細菌耐藥性及食品抗生素殘留等問題日趨嚴重。本項目以尋找安全、有效的防治乳房炎的方法，系統的研究了GPR109A抗乳房炎作用及其機制。首先收集正常奶牛和乳腺炎乳腺組織，通過檢測GPR109A表達量和乳腺炎症狀態，分析GPR109A與乳腺炎的相關性。結果發現乳腺炎奶牛乳腺組織中的GPR109A顯著升高，且乳腺中組織的炎症水平也顯著升高。這一結果表明GPR109A可能與乳腺炎密切相關。為了驗證GPR109A與乳腺炎的關係，我們在WT和GPR109A-/-小鼠中利用乳腺內注射LPS誘導乳腺炎小鼠模型，並飼餵GPR109A激動劑煙酸。結果發現煙酸在WT小鼠中能抑制乳腺內損傷、炎症反應以及修復血-乳屏障，而在GPR109A-/-小鼠中煙酸沒有這些作用。在小鼠乳腺上皮細胞系（Eph4-Ev）的機制研究發現GPR109A活化後通過AMPK/Nrf2/自噬途徑抑制炎症反應和修復血-乳屏障。接著，我們進一步在原代奶牛乳腺上皮細胞中對GPR109A的這一作用及機制進行了驗證。以上結果表明GPR109A能抑制乳腺的炎症反應和修復血-乳屏障。這些結果為乳房炎的防治提供了新的靶點，對安全、有效的防治奶牛乳房炎具有推動作用。
