《GATA3調控DNA雙鏈斷裂修復分子機制研究》是依託同濟大學，由蔣穎擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：GATA3調控DNA雙鏈斷裂修復分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：蔣穎
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
GATA3是轉錄因子GATA蛋白家族中一員，其在諸多器官的發育過程中起關鍵作用。最新研究顯示GATA3與乳腺癌發生存在相關性，而DNA雙鏈斷裂修復與腫瘤發生關係緊密，GATA3是否參與調控DNA修復進而影響乳腺癌發生並未被研究。項目申請者初步研究數據顯示，GATA3在同源重組修復DNA雙鏈斷裂過程中不可或缺。後續機制顯示GATA3可能通過兩種途徑調控DNA雙鏈斷裂，一種是直接到達DNA損傷處直接參與修復，另一種是作為轉錄因子影響同源重組修復通路中關鍵蛋白表達間接參與調控。此外，申請人還發現與其它同源重組基因在乳腺癌中表達相類似，GATA3在乳腺癌中表達也相對增加，且表達與生存率呈現負相關。本課題將致力於深入探索GATA3直接和間接調控同源重組修復分子機制，為利用其作為乳腺癌診斷和靶向治療奠定理論基礎。
結題摘要
GATA3是一個重要的轉錄因子，在乳腺發育中起著關鍵作用；此外，其亦可以通過與重要DNA修復因子PARP1、BRCA1相互作用通過轉錄在乳腺癌發生中起著關鍵作用。但是GATA3是否參與調控腫瘤發生中關鍵的DNA修復過程並未被深入探索。在這個項目中，我們發現GATA3是DNA雙鏈斷裂損傷修復中重要修復通路之一-同源重組-所必需。機制的研究揭示GATA3能夠影響CtIP的mRNA和蛋白水平，而CtIP是同源重組過程中關鍵的末端切除步驟所必需。GATA3能夠與CtIP啟動子中的-2119至2130以及-2274至2285區域相結合，促進CtIP啟動子活性，提高同源重組修復效率進而提高基因組穩定性。在DNA損傷脅迫條件下，更多GATA3能夠到達CtIP啟動子區域從而起始CtIP表達。在GATA3敲降的細胞系中，過表達CtIP能夠拯救下調的HR以及降低其對etoposide的敏感性。通過生物信息學分析方法，我們發現在乳腺癌癌旁中GATA3與CtIP表達呈現極強的正相關，而這種相關性在乳腺癌中消失，提示我們GATA3可能在乳腺癌中喪失了對CtIP的有序調控。通過進一步生物信息學分析我們獲得了數個GATA3的突變，通過對這些突變體的研究我們發現了數個突變體喪失了對CtIP啟動子活性的調控能力，亦失去了對同源重組修復的調控。這些數據證明了GATA3在乳腺癌發生中可能是一個抑癌基因。
