《Decorin對禽類成肌細胞增殖分化的調控作用及機理研究》是依託華南農業大學,由王麗娜擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名:Decorin對禽類成肌細胞增殖分化的調控作用及機理研究
- 項目類別:青年科學基金項目
- 項目負責人:王麗娜
- 依託單位:華南農業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
Decorin(DC)是細胞外基質的一種重要成分。以往的研究表明,DC核心蛋白能與TGF-β家族成員結合,對骨骼肌細胞的增殖與分化具有重要的調控作用,但其作用機制及信號通路尚不確定。本實驗室的前期研究發現,在雞胚骨骼肌的發育過程中不同品種肉雞(快大雞和土種雞)之間生肌基因呈現差異表達模式,可能與DC的調控有關。本項目擬採用體外添加DC和慢病毒介導的DC基因沉默技術,研究DC對雞胚不同部位成肌細胞增殖分化的調控作用及信號通路;在整體水平上,通過蛋內注射的方法研究DC對於雞胚不同部位肌肉發育的影響,進而揭示DC對禽類肌纖維發育的可能調控機制;此外構建禽類DC啟動子報告基因重組質粒,對啟動子進行活性分析,篩選調控因子,揭示機體對DC轉錄的調控途徑。項目的研究結果不僅能深入揭示DC對禽類肌纖維發育的調控機制同時可望對以提高肉品質為目標的遺傳改良和營養調控提供理論依據。
結題摘要
核心蛋白聚糖(decorin)是細胞外基質(ECM)的重要成分。以往研究表明,decorin能通過抑制myostatin的活性而促進嚙齒類動物成肌細胞的增殖和分化,但decorin對禽類成肌細胞增殖有何影響,其自身的表達調控機制如何在禽類均未見報導。本項目研究結果發現,在QM7細胞中MSTN/Smad3信號通路參與了decorin誘導的禽類成肌細胞增殖;禽類成肌細胞中FXR可以轉錄水平調控decorin的表達; FXR的激動劑(CDCA)可以促進FXR和decorin的表達,同時上調成肌相關基因(MyoD、Myogenin)的表達,並抑制了MSTN下游Smad3的磷酸化;而FXR阻斷劑呈現相反的效應,提示decorin-MNST/Smad3信號通路參與了FXR誘導的禽類成肌細胞增殖。在活體水平上,通過在胚蛋內注射不同劑量的CDCA發現:低劑量CDCA顯著提高了42日齡時肉雞體重、腿肌重、肝臟重、16胚齡和岀殼時單位面積腿肌肌纖維數目;注射高劑量CDCA顯著提高了出殼時雛雞體重和42日齡時肉雞肌纖維直徑;RT-PCR結果顯示,出殼時和42日齡時500ng/50μL CDCA組腿肌中decorin和成肌相關基因(Myf-5、MyoD、Myogenin)mRNA表達水平顯著上調,表明胚蛋注射CDCA顯著促進禽類胚胎期骨骼肌纖維的發育,提高產肉潛力。本研究分別從細胞和活體試驗證明CDCA通過激活FXR促進了禽類骨骼肌發育,並且Decorin-MSTN/Samd3信號通路可能參與FXR介導對成肌細胞增殖的調節。項目研究成果在Poultry Science 發表文章一篇。全國動物生理生化會議報告2次,培養博士生1名,碩士生1名。