《Decorin基因轉染調控TGF-beta/Smad抑制腰椎黃韌帶增生的實驗研究》是依託山東大學，由劉新宇擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：Decorin基因轉染調控TGF-beta/Smad抑制腰椎黃韌帶增生的實驗研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：劉新宇
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
退變性黃韌帶增生是老年腰椎退變性椎管狹窄症的重要病理改變。退變性黃韌帶中TGF-?1及炎症因子COX-2、TNF-α、IL-1、8、15 高表達提示：韌帶纖維化或瘢痕修復可能是黃韌帶增生肥厚的病理學機制之一。TGF-?下游Smad通路及其他通路在纖維化疾病、瘢痕組織纖維性修復過程中具重要作用。NF-κB是炎症蛋白表達重要調控因子，TGF-?1對NF-κB依賴性炎性反應的調控作用已在其它纖維化疾病中得到證實。Decorin可抑制TGF-β1表達、干擾Smad信號轉導，抑制纖維化進程。我們通過研究肥厚黃韌帶中TGF-?1、Smad、NF-κB、Decorin的表達；以及外源性Decorin 可否可通過抑制TGF-?/Smad途徑及下游NF-κB調控黃韌帶增生進程，探討TGF-β/Smads通路、NF-κB及Decorin在黃韌帶增生病理網路中的重要作用，探討藥物預防及治療腰椎管狹窄症的新途徑。
結題摘要
腰椎管狹窄產生的神經症狀嚴重影響著患者生活質量，且多發生於老年患者，使得大量症狀嚴重、影像學表現典型的患者因為基礎疾病或身體狀態不能耐手術手而長期遭受疾病的折磨。因此如何預防或降低黃韌帶肥厚程度是腰椎管狹窄症保守治療的基礎及臨床病理機制研究中的難點和重點。退變性黃韌帶中TGF-ß1及炎症因子COX-2、TNF-α、IL-1、8、15 的高表達已得到證實。TGF-ß1及其下游的Smad信號傳導通路在纖維化疾病、瘢痕組織纖維性修復的病理過程中具有重要意義。NF-κB是炎症蛋白表達的重要調控因子，且TGF-ß1對NF-κB依賴性炎性反應的調控作用已在其它纖維化疾病中得到證實。因此本研究旨在探討TGF-ß1的具體作用通路及其與NF-κB在黃韌帶增生病理網路中的相互作用，為今後黃韌帶增生抑制藥物的研製提供依據。首先，在獲得醫院倫理委員會以及患者的同意後，我們術中取得因腰椎管狹窄症（LSS）以及在影像學上沒有黃韌帶肥厚表現的腰椎間盤突出症(LDH)於我院行腰椎手術患者的黃韌帶標本，並記錄每位患者的個人信息及影像學資料。其中21例LSS患者及20例LDH患者的黃韌帶標本用於免疫組化、纖維染色、Western－blot等實驗，剩餘LSS患者的標本採用膠原酶預消化組織塊培養法進行黃韌帶細胞（LFC）原代培養，將處於指數生長期（3-6代）的細胞進行下一步分組實驗，採用WESTERN、Elisa及實時螢光定量PCR(RT—PCR)法檢測LFC中TGF-ß1、Smads、NF-κB及炎性介質IL-1β、IL-8、IL-15等的表達。在組織學實驗中我們發現：肥厚的黃韌帶出現明顯的退行性表現，LSS組患者黃韌帶Smad-2、NF-κB含量較LDH組增高，與其纖維化程度成正比。在細胞學實驗中，我們發現：TGF-ß1主要通過Smad-2信號通路發揮作用； NF-κB通過調控炎症因子的基因表達而在黃韌帶肥厚的病理過程中有著重要作用；在LFC中TGF-ß1促進NF-κB的表達。本研究成果為腰椎黃韌帶增生的保守治療中TGF-ß1和NF-κB抑制劑藥物治療的可能性提供了理論依據。
