DNA甲基化是基因表達調控的一種重要機制,DNA甲基化檢測是指利用各種方法對腫瘤細胞DNA甲基化程度進行測定。在惡性腫瘤的發展中,甲基化的狀態並不是一成不變,腫瘤細胞內全基因組的低甲基化程度與疾病進展、腫瘤大小和惡性程度都有密切的關係,DNA甲基化檢測對腫瘤惡性程度的判斷有重要意義。
基本介紹
- 中文名:DNA甲基化檢測
- 臨床意義:可用於腫瘤的預測
檢查前準備
2.選取血液、其他體液或細胞進行檢測,如需要進行有創傷的操作則需要提前完善凝血功能測定等相關檢查。
操作方法
2.基因組DNA進行化學修飾,主要採用亞硫酸氫鈉修飾,注意溫度和時問的掌握,修飾後的DNA單鏈比較脆弱,操作應輕柔,避免劇烈振盪。適當增加亞硫酸氫鈉的濃度,同時適當減少基因組DNA的量可防止假陽性的出現。
3.以修飾後的基因組DNA為模板,分別用甲基化引物和非甲基化引物進行PCR擴增,可選用熱啟動酶或者採用降落PCR等方法提高PCR擴增的特異性。
4.將PCR產物進行瓊脂糖凝膠電泳或聚丙烯醯胺凝膠電泳以判斷結果。