甲基化特異性PCR

甲基化特異性PCR(Methylation-Specific PCR,MS-PCR)是一種特異位點甲基化檢測技術。

基本介紹

• 中文名：甲基化特異性PCR
• 外文名：(Methylation-Specific PCR
• 類型：一種特異位點甲基化檢測技術
• 基本原理：亞硫酸氫鈉處理基因組DNA

技術原理

其基本原理是用亞硫酸氫鈉處理基因組DNA，未甲基化的胞嘧啶變成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變。因此從理論上講，用不同的引物做PCR，即可檢測出這種差異，從而確定基因有無CpG島甲基化。根據目的基因修飾前後的改變，就可以相應設計M和U引物，有時我們需要設計兩輪引物。擴增產物用DNA瓊脂糖凝膠電泳，凝膠掃描觀察分析結果。

優缺點

這種方法靈敏度高，無需特殊儀器，因此經濟實用，是套用最為廣泛的檢測方法。不過也存在一定的局限性，預先需要知道待測片段的DNA序列，引物的設計非常重要。另外，亞硫酸氫鹽處理也十分關鍵，若處理不完全則可能導致假陽性的出現。