CCK-8

CCK-8

CCK-8試劑中含有WST–8:化學名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽,它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲臢產物(Formazan)。生成的甲臢物的數量與活細胞的數量成正比。用酶聯免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值,可間接反映活細胞數量。該方法已被廣泛用於一些生物活性因子的活性檢測、大規模的抗腫瘤藥物篩選、細胞增殖試驗、細胞毒性試驗以及藥敏試驗等。

優點,缺點,專利,

優點

1、使用方便,省去了洗滌細胞,不需要放射性同位素和有機溶劑;2、檢測快速;3、靈敏度高,甚至可以測定較低細胞密度;4、重複性優於MTT;5、對細胞毒性小;6、為1瓶溶液,毋需預製,即開即用。
CCK-8試劑盒CCK-8試劑盒

缺點

1、與MTT相比,CCK-8和XTT的價格比較貴。2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養基顏色接近,不注意的話容易產生漏加或多加。

專利

Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)是由日本同仁化學研究所(Dojindo)開發的檢測細胞增殖、細胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中採用自己開發的水溶性四唑鹽-WST-8,在日本,美國,歐洲等國家地區均持有專利,同仁化學研究所於2006年在中國獲得了WST-8的註冊商標。
CCK-8法與普通的MTT法相比,具有顯著特點:
★靈敏度高,數據可靠,重現性好
★操作簡便,省時省力
★水溶性,不需要換液,尤其適合於懸浮細胞
★無需放射性同位素和有機溶劑,對細胞毒性低
★為1瓶溶液,毋需預製,即開即用
CCK-8用途:藥物篩選細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗
CCK-8試劑盒在國內知名科研院所、重點大學、三甲醫院被廣泛套用,國際認可度高,使用CCK-8發表的中外文獻達600多篇,其中截止08年底SCI影響因子IF>10分的論文有37篇,最高IF26.5分。

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