《ApoCIII調節Lp-PLA2的分子機制研究》是依託吉林大學，由唐小春擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：ApoCIII調節Lp-PLA2的分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：唐小春
- 依託單位：吉林大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
脂蛋白相關磷脂酶A2（Lp-PLA2）是預測心血管疾病發生和粥樣斑塊不穩定性的炎症相關因子。在人體循環中主要與LDL結合，促動脈粥樣硬化發生；而在小鼠中，卻主要與HDL結合，對心血管起到保護作用。與小鼠相比，豬的脂蛋白譜與人類相似，是研究Lp-PLA2相關機制的最適模型。在本實驗室前期製作的人載脂蛋白C3（apoCIII）轉基因豬血液中，Lp-PLA2的活性是對照組的3倍，預實驗結果顯示，apoCIII在平滑肌細胞中顯著上調Lp-PLA2的表達。因此，本研究擬以apoCIII轉基因豬為基礎，以Lp-PLA2為研究對象，在豬胸主動脈和平滑肌細胞中，用分子和細胞生物學方法檢測apoCIII對Lp-PLA2的調節和對其介導平滑肌細胞生物學行為的影響；並採用啟動子和信號通路分析等方法深入闡明apoCIII調節 Lp-PLA2的分子機制，為研究Lp-PLA2在動脈硬化發生髮展中受調節的機制奠定基礎。
結題摘要
心血管疾病（CVD）是當今世界威脅人類最嚴重的疾病，動脈粥樣硬化（AS）是這類疾病具共同的病理基礎。因此，研究相關基因在其發生髮展過程中的調節機制對預防和治療動脈粥樣硬化具有重要意義。 Lp-PLA2是心血管疾病的獨立危險因素和預測因子，與動脈粥樣硬化和CVD具有正相關性，是目前評估動脈粥樣硬化斑塊不穩定性的炎症相關因子。Lp-PLA2不僅能夠預測動脈粥樣硬化斑塊的不穩定性和CVD發生的機率，抑制Lp-PLA2活性還能對動脈粥樣硬化發揮重要的臨床治療作用。 人類apoCIII大部分由肝臟合成，少部分由小腸合成。其表達水平升高則導致血液循環中甘油三酯增加，這也在轉基因小鼠、兔和豬中得到證實。 因此，本研究以apoCIII轉基因豬為基礎，觀察該模型中Lp-PLA2活性及表達的變化； 並在巨噬細胞系中驗證apoCIII對Lp-PLA2表達的調節； 研究apo CIII調節Lp-PLA2表達的分子機制及Lp-PLA2介導apo CIII功能的研究。觀察脂肪酸對Lp-PLA2表達的影響；研究脂肪酸（OA-NO2）調節Lp-PLA2表達的分子機制及Lp-PLA2 介導的脂肪酸的功能。系統闡明Lp-PLA2在體內和體外表達調控的分子機制。 研究表明，在豬體內，apo CIII的表達與血液中Lp-PLA2水平正相關，並且在apo CIII轉基因豬中，Lp-PLA2的mRNA水平和活性均顯著升高；進一步研究發現，apo CIII上調Lp-PLA2表達具有時間和濃度梯度依賴性，並且是通過MAPK和NFκB兩條信號通路進行調節；在巨噬細胞中，apo CIII激活炎症因子，該激活作用被Lp-PLA2抑制劑顯著抑制。OA-NO2顯著抑制Lp-PLA2表達，並且該作用呈濃度和時間梯度依賴性；在豬單核巨噬細胞中，OA-NO2對Lp-PLA2基礎表達水平沒有影響，但其能夠抑制誘導（apo CIII）的Lp-PLA2表達升高；這種抑制作用也主要是由MAPK和NFκB兩條信號通路介導；但並不依賴於NO的產生和PPARγ的激活。 本項目研究結果揭示apo CIII及OA-NO2在體內和體外均能上調Lp-PLA2表達及調節的分子機制，為進一步研究Lp-PLA2與高甘油三脂的關係提供理論基礎，並使我們深入認識動脈粥樣硬化的發病機制
