人載脂蛋白CIII引發小型豬動脈粥樣硬化致病機理的研究

《人載脂蛋白CIII引發小型豬動脈粥樣硬化致病機理的研究》是依託吉林大學，由丁瑜擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：人載脂蛋白CIII引發小型豬動脈粥樣硬化致病機理的研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：丁瑜
• 依託單位：吉林大學

項目摘要

動脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）及其併發症是導致人類死亡的頭號殺手，而高脂血症是AS發生的主要誘因。小型豬因其心血管系統與人類極其相似，是研究AS的理想模型動物。載脂蛋白（apo）CIII對調節血漿脂質水平起重要作用，我們在研究自主建立的高表達人apoCIII高脂血症小型豬中發現其易發生AS，但apoCIII致AS發生的具體機制尚未明確。本研究將在前期工作基礎上，利用高表達人apoCIII轉基因小型豬誘發AS，並對其進行病理指標檢測，利用基因晶片對主動脈斑塊處的差異表達基因進行篩查，並對獲得的主要差異表達基因進行驗證，解析apoCIII介導AS發生的關鍵信號調控網路。研究結果可為揭示apoCIII功能及其在AS發生過程中的作用提供新的理論依據，對揭示AS的病因、發病機理，探討基因治療方法以及進行新藥研發等具有重要的理論意義和醫學價值。

結題摘要

理解apoCIII在血管內皮細胞及平滑肌細胞中的功能及作用機制，可為揭示apoCIII在動脈粥樣硬化發生過程中的作用提供新的理論依據。本項目利用高通量測序技術獲得apoCIII刺激前後血管內皮細胞的差異表達基因，對apoCIII介導的信號通路進行深入探討。 利用酶解法成功分離豬血管平滑肌細胞與內皮細胞並進行體外培養，通過免疫螢光技術對細胞純度進行鑑定，結果顯示細胞純度較高。 通過對apoCIII處理組與對照組進行轉錄組測序，得到大量數據，對這些轉錄組數據進行比較分析，獲得647個差異表達基因，其中上調基因390個，下調基因257個。實時螢光定量PCR（qRT-PCR）檢測表明，高通量測序數據結果正確可靠。GO及Pathway分析結果顯示，差異表達基因的功能涉及免疫應答、細胞凋亡及死亡等。這表明apoCIII可通過炎症反應、細胞黏附、細胞凋亡等分子通路影響豬主動脈血管內皮細胞的生理功能。 對差異基因進行分析，發現TLR10基因mRNA表達水平呈現較高的變化趨勢。敲減TLR10後，發現一些促炎細胞因子如IL6、IL-1α等mRNA表達量隨著TLR10表達量的下調而下調。這表明apoCIII可能通過TLR10調控內皮細胞炎症反應的發生，從而引發動脈粥樣硬化的發生。 本研究結果系統了解了apoCIII在血管內皮細胞中的作用及其調控網路，為解析apoCIII對動脈粥樣硬化形成的分子機制提供理論基礎。截至目前，在本項目的資助下，發表中文核心論文1篇（已錄用），已投稿SCI一篇，正在撰寫 SCI研究論文2篇，協助培養博士1 名，碩士1名。